口蹄疫病毒OH株结构蛋白基因VP1的克隆与表达

摘要：

采用RT-PCR方法扩增获得了O型口蹄疫病毒的主要免疫原VP1基因,将其插入pMD18 T载体进行序列分析,结果表明,所获得的基因片段含有完整的FMDV结构蛋白VP1编码区.根据表达载体pQE-Trisystem的克隆位点序列和该VP1基因片段的末端序列设计了1对表达引物,以重组pMD T-VP1阳性质粒为模板,扩增获得了VP1基因,通过酶切将其克隆至表达载体pQE-Trisystem上.经测序证实,重组表达质粒所含的外源基因VP1编码框正确无误.将重组表达质粒pQE-VP1转化至大肠埃希氏菌M15,通过IPTG诱导促使VP1基因高效表达,SDS-PAGE和Western-blot分析表明,表达产物大小与预期的结果(26 ku)一致,且具有良好的反应原性.以2 mmol/L IPTG诱导表达5 h时表达量最高,其中70%～80%的目的蛋白存在于菌体裂解后的上清中,表明外源基因VP1主要以可溶性方式表达.

关键词：口蹄疫病毒、VP1基因、基因克隆、表达

所属期刊栏目：36

分类号：S852.659.6;Q786(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划2003AA241110

在线出版日期：2006-08-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：515-518