狂犬病病毒糖蛋白膜外区基因在大肠埃希氏菌中的高效表达

摘要：

为获得狂犬病病毒(RV)糖蛋白抗原,采用RT-PCR方法从狂犬病病毒ERA株中扩增了编码RV糖蛋白的全长基因,将其克隆于pMD18-T载体,再经PCR扩增出糖蛋白全长基因和膜外区基因,将其分别亚克隆至原核表达载体pET-28a(+)、pET-32a(+)和pGEX-4T-1中,经PCR和双酶切鉴定以及序列分析,表明已成功构建了重组质粒.将重组质粒转化到大肠埃希氏菌BL21(DE3)中进行表达,结果显示,克隆到pET-32a(+)的糖蛋白膜外区基因表达量最高,目的蛋白表达量占菌体总蛋白的45.4%.经Western-blotting检测,不同载体表达的糖蛋白膜外区产物均可与兔抗RV多抗发生特异性反应,表明,重组蛋白具有良好的反应原性.

关键词：狂犬病病毒、糖蛋白膜外区、高效表达

所属期刊栏目：36

分类号：S852.659.5;Q786(动物医学（兽医学）)

在线出版日期：2006-07-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：449-453