10.3969/j.issn.1673-4696.2006.02.016
骆驼β-防御素caBD-1 cDNA基因全序列RACE扩增方法的建立
为获得骆驼β-防御素基因(caBD-1 cDNA)的全长序列,采用锚定PCR RACE技术,根据已获得的骆驼β-防御素基因的部分已知序列,设计了1条特异性引物作为上游引物,将反转录引物中的部分序列即3′接合器引物作为下游引物,成功地克隆了caBD-1 cDNA的3′末端序列;采用反向嵌套 PCR RACE技术,根据已获得的骆驼β-防御素 cDNA的部分序列,设计了1条5′末端磷酸化的特异性反转录引物和2对特异性反向嵌套 PCR引物,首先进行反转录(RT),然后将mRNA反转录的 cDNA进行环化,最后进行反向嵌套巢式 PCR ,成功地克隆了骆驼β-防御素 caBD-1 cDNA的5′末端序列.结果显示,获得了骆驼β-防御素caBD-1 cDNA基因的全序列.证实,RACE技术用于防御素基因的扩增是可行的.
β-防御素、3’RACE、5’RACE、锚定PCR、反向嵌套PCR、骆驼
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S852.1;Q503(动物医学(兽医学))
中国科学院资助项目30160063;内蒙古高等学校科研项目ZL010144
2006-04-06(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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