牦牛β-干扰素基因的克隆与表达

摘要：

提取经植物血凝素(PHA)诱导培养的牦牛外周血淋巴细胞总RNA,采用RT-PCR技术扩增并克隆了牦牛IFN-β基因,经PCR和酶切鉴定及测序分析,再克隆到pGEX-4T-1质粒载体中,构建了原核表达重组载体,经IPTG诱导表达重组蛋白,可表达约41 ku的牦牛IFN-β融合蛋白,主要以包涵体形式存在.序列分析结果表明,牦牛IFN-β基因ORF为498 bp,与乳牛IFN-β参考序列的同源性高达98.6%,与猪、马、猫、人IFN-β基因的同源性分别为72.5%、68.9%、66.1%和63.5%,而与狗、鼠、鸡等动物的同源性均不超过25%;分子遗传进化树分析也表明,牦牛与乳牛IFN-β基因的亲缘关系最近,而与鼠、狗、鸡等的亲缘关系较远,说明IFN-β基因有种属差异性.

关键词：β-干扰素、牦牛、基因克隆、同源性、分子进化树、表达

所属期刊栏目：36

分类号：S859.797;Q786(动物医学（兽医学）)

资助基金：农业部农业结构调整技术研究专项基金04-10-03B;甘肃省兰州市科技攻关项目05-1-47

在线出版日期：2006-03-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：40-45