10.3969/j.issn.1673-4696.2006.01.007
猪传染性胸膜肺炎放线杆菌外膜蛋白基因的克隆和表达
以猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(APP)血清7型25-4株基因组DNA为模板,用PCR扩增外膜蛋白(OMP)基因特异片段,并克隆于pMD 18-T中,经酶切及核苷酸序列分析鉴定后,亚克隆于原核表达载体pGEX-6P-1,成功构建了重组表达载体pGEX-omp;以此转化大肠埃希氏菌BL21(DE3),经SDS-PAGE鉴定,表达的可溶性融合蛋白分子质量约为61 ku,命名为GST-OMP.以GST亲和层析柱纯化并利用Xa因子酶解,获得切掉标签的OMP.经ELISA检测,该OMP蛋白能够与兔抗APP的阳性血清反应,具有很好的免疫活性.GST-OMP蛋白的成功表达为APP OMP相关分子生物学功能的研制奠定了基础.
猪胸膜肺炎放线杆菌、外膜蛋白基因、克隆、表达
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S852.619;Q786(动物医学(兽医学))
2006-03-16(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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