禽源鹦鹉热衣原体MOMP基因重组腺病毒载体的构建与鉴定

摘要：

对从疑似禽衣原体病鸡分离鉴定的鹦鹉热衣原体用PCR方法扩增,获得了完整的外膜主蛋白(MOMP)基因,将其克隆到pMD 18-T Simple载体中,用BglⅡ和SalⅠ双酶切出目的基因,并将其与已线性化的pshuttle-CMV穿梭载体连接.然后,将阳性质粒转化入含有腺病毒骨架载体的BJ5183感受态细胞中进行同源重组.将同源重组的腺病毒粒子转入DH5α大肠埃希氏菌增殖.提取同源重组后的腺病毒粒子转染AD-293细胞,待重组腺病毒在AD-293细胞中传代稳定后,经PCR技术检测,扩增到了MOMP目的基因; 用间接免疫荧光试验检测,呈阳性反应,证明目的蛋白得到了表达.经测定,重组腺病毒的效价达3.9×1010 PFU/mL.

关键词：鹦鹉热衣原体、MOMP基因、腺病毒载体、表达

所属期刊栏目：36

分类号：S852.67;Q786(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家科技攻关项目2003AA241110

在线出版日期：2006-03-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：13-17