牛分枝杆菌mpb64和Ag85B融合基因在大肠埃希氏菌中的原核表达

摘要：

以牛分枝杆菌Vallee株基因组DNA为模板,应用PCR扩增获得mpb64和Ag85B两个目的基因片段,采用重叠延伸剪接技术(SOE)剪接mpb64和Ag85B,得到融合基因mpb64-Ag85B;将融合基因片段先克隆于pMD 18-T载体,再亚克隆到表达载体pET32a(+)中,得到重组质粒pET64-85.该重组质粒经核苷酸序列测定,显示其中的外源片段与期望的序列一致;其BL21(DE3)转化菌经IPTG诱导表达带有6个组氨酸标签的融合蛋白;用Ni2+螯合层析方法纯化融合蛋白,Western-blotting分析结果显示,该融合蛋白能与抗牛分枝杆菌阳性血清发生反应.

关键词：牛分枝杆菌、融合基因、原核表达

所属期刊栏目：35

分类号：S852.618;Q786(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家"火炬计划"2002BA518A04

在线出版日期：2006-01-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：946-949