猪传染性胃肠炎病毒TH-98株M蛋白基因的克隆及原核表达

摘要：

构建了TGEV TH-98株M基因序列的原核表达载体,利用RT-PCR方法从TGEV TH-98株中扩增出M蛋白基因,并亚克隆至原核表达载体pGEX-6P-1上,转化大肠埃希氏菌BL21(DE3)pLysS,用IPTG诱导重组菌株表达了融合蛋白.结果表明,从TGE TH-98株克隆到了M基因 cDNA,该基因全长789 bp,与T014株、Purdue株、TFI株和96-1933株的M基因同源性分别为92.37%、98.35%、99.87%和96.96%.SDS-PAGE电泳结果显示,重组表达质粒获得了约57 ku的目的带,其中M蛋白的分子质量约为31 ku,与预期的结果一致;Western-blotting分析表明,融合表达产物可与TGEV全病毒制备的阳性血清发生反应.证实,TGEV的M基因高度保守,构建的M基因原核表达载体pGEX-6P-TM能在大肠埃希氏菌中获得高效表达.

关键词：传染性胃肠炎病毒、猪、M基因、克隆、测序、原核表达

所属期刊栏目：35

分类号：S852.659.6;Q786(动物医学（兽医学）)

资助基金：黑龙江省科技厅科技攻关项目GC01B510

在线出版日期：2005-12-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：869-874