口蹄疫病毒OH99株基因组全长cDNA的构建

摘要：

根据口蹄疫病毒China99株的基因组序列,利用引物软件设计了5对覆盖口蹄疫病毒OH99株基因组的重叠引物,从感染口蹄疫病毒OH99株的乳鼠胴体中提取了病毒基因组RNA,采用RT-PCR方法分别扩增了5条基因片段,利用单一酶切位点,分别消化各扩增片段和pBluescript SK+载体,在体外分别进行了5′半分子和3′半分子的构建.然后用人工合成基因法合成一段含有29个C-碱基的基因片段,利用两端的限制性内切酶位点,将该基因片段插入到5′半分子中,最后将5′半分子和3′半分子连接成基因组全长cDNA分子.经PCR鉴定及全长cDNA测序,分别扩增出了各基因片段,全基因组序列测定结果也与原来的测序结果一致,证实成功构建了口蹄疫病毒OH99株基因组全长cDNA分子.

关键词：口蹄疫病毒、OH99株、全长cDNA

所属期刊栏目：34

分类号：S852.659.6:Q523(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家重点基础研究发展计划973计划GB1999011903

在线出版日期：2004-09-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：3-7