猪2型圆环病毒ORF1基因的克隆及表达

摘要：

根据GenBank中猪圆环病毒2型(PCV-2)的ORF1基因序列,设计合成了1对引物,对PCV-2广东株(GD)ORF1基因进行PCR扩增,将扩增的ORF1基因克隆入pMD 18-T载体,获得的重组质粒命名为pMD-ORF1.将ORF1的KpnⅠ和XbaⅠ双酶切产物插入原核表达载体pBAD/gⅢ C得到重组子,命名为pBAD/gⅢ-ORF1.序列分析表明,克隆的ORF1与德国分离株AF201897核苷酸序列的同源性高达99.5%;与其他PCV-2株的核苷酸序列同源性为92.1%～99.9%,推导的氨基酸序列同源性为90.2%～99.5%.同时,测序结果表明,克隆的ORF1准确插入了pBAD/gⅢ C的多克隆位点,未改变读码框.用L-阿拉伯糖诱导表达,收集菌液进行SDS-PAGE和Western-blotting分析,结果表明PCV-2 ORF1在pBAD/gⅢ C中获得了高效融合表达,其表达蛋白的分子质量约为41ku.

关键词：猪2型圆环病毒、ORF1基因、克隆、表达

所属期刊栏目：34

分类号：S852.659.2(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划2003 AA241110;广东省农业科技攻关项目2003B21 404

在线出版日期：2004-06-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：3-7