猪嵴病毒VP0基因的原核表达及间接ELISA检测方法的建立

摘要：

本研究旨在建立一种检测猪嵴病毒(PKV)抗体的间接ELISA检测方法.通过原核表达系统表达PKV VP0基因作为包被抗原,并通过Western blot鉴定证明重组蛋白与PKV阳性血清能发生良好的特异性反应.优化反应条件,得出PKV VP0间接ELISA检测方法最适反应条件是抗原包被浓度为0.62μg/mL,血清稀释浓度为1:200,最佳酶标二抗稀释浓度1:5000,使用5％脱脂奶粉作为封闭液37℃孵育1 h,显色10 min,当检测样品OD450<0.225判定血清样品抗体为阴性,OD450≥0.225判定血清样品抗体为阳性,且特异性高、重复性好,与Western blot符合率达到95.6％.PKV VP0蛋白间接ELISA方法的建立,作为一种操作简单,灵敏度高,特异性高,重复性好的血清学检测方法,为PKV的监测和预防提供了技术支持.

关键词：猪嵴病毒、VP0基因、原核表达、间接ELISA检测

所属期刊栏目：31

分类号：S852.651(动物医学（兽医学）)

资助基金：河北省重点研发计划项目;河北省农业产业技术体系生猪创新团队

在线出版日期：2023-05-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：72-77