双抗体阻断ELISA检测小反刍兽疫病毒抗体的方法建立

摘要：

小反刍兽疫病毒(PPRV)的N蛋白是血液中此病毒抗体的主要靶蛋白,本研究克隆并表达N蛋白,将纯化后的N蛋白免疫新西兰大白兔来制备多克隆抗体,采用饱和硫酸铵沉淀法收集多克隆抗体,再用辣根过氧化物酶标记此抗体.用纯化的N蛋白包被96孔板,酶结合物多克隆抗体作为检测抗体,建立了检测小反刍兽疫病毒双抗体阻断ELISA方法,经过反复优化,N蛋白的最佳包被浓度为3.0μg/mL,酶结合物抗体的最佳稀释比例为1:800,利用本研究确定的方法对200份血清样本进行检测,符合率为95％(169/200),本研究确定的方法可用于检测血清中PPRV的抗体水平,为今后小反刍兽疫的防控和疫苗效果的检测提供基础.

关键词：小反刍兽疫、双抗体阻断ELISA、N蛋白、多克隆抗体

所属期刊栏目：31

分类号：S852.4(动物医学（兽医学）)

资助基金：天津市农业发展服务中心青年科技创新项目Zxkj202104

在线出版日期：2023-05-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：61-65