禽致病性大肠杆菌Ⅲ型分泌系统2EivC点突变的构建及其ATPase活性分析

摘要：

为了分析禽致病性大肠杆菌(Avian pathogenicEscherichia coli,APEC)Ⅲ型分泌系统2(E.coli TypeⅢsecretion system 2,ETT2)EivC ATPase关键活性位点,本研究通过比对分析病原菌ATPase序列,筛选APEC ETT2 EivC的关键位点.然后设计点突变引物,通过PCR方法构建EivC点突变片段,构建EivC点突变重组表达质粒.经IPTG诱导表达后纯化相应蛋白,并检测其ATPase活性.结果显示,EivC蛋白包含F0F1 ATPase的保守序列,且具有ATPase活性.测序结果显示EivC第175、199、201、233位氨基酸突变成功,融合蛋白获得成功表达与纯化.然而,点突变与野生型EivC的ATPase活性差异不具有显著统计学意义.本研究结果表明第175、199、201、233位氨基酸不影响EivC的ATPase活性.

关键词：禽致病性大肠杆菌、Ⅲ型分泌系统2、eivC基因、ATPase

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分类号：S852.612(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金项目31572523;公益性农业科研专项项目201303044

在线出版日期：2017-07-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：47-53