H3N2亚型犬流感病毒NP蛋白的表达纯化及多克隆抗体制备

摘要：

将分离的H3N2亚型犬流感病毒(Canine influenza virus,CIV) A/Canine/Nanjing/11/2012 (H3N2)株的核蛋白(NP)基因克隆至原核表达载体pET28a(+)中,构建重组表达质粒pET-NP,然后转化大肠杆菌E.coli Rosetta(DE)感受态细胞,经IPTG诱导后,采用SDS-PAGE和Western blot进行分析.结果显示,大肠杆菌表达的重组NP蛋白的分子量约为61 kDa,与预期相符,并能与犬CIV阳性血清发生特异性反应.将表达的重组NP蛋白进行纯化后,免疫大白兔制备抗NP蛋白多克隆抗体血清,Western blot检测该血清可与CIV的NP蛋白发生特异性反应,间接ELISA检测该多克隆抗体血清的效价达1:30 000,显示了较高的抗体效价.本研究为CIV快速检测方法的建立和流行病学调查奠定了科学依据.

关键词：犬流感病毒、H3N2亚型、核蛋白、原核表达、多克隆抗体

所属期刊栏目：25

分类号：S852.659.5(动物医学（兽医学）)

资助基金：江苏省农业科技自主创新资金项目CX151065

在线出版日期：2017-05-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1-6