柔嫩艾美耳球虫G6-PI基因的克隆、序列分析与原核表达
为研究柔嫩艾美耳球虫（Eimeria tenella）葡萄糖-6-磷酸异构酶（glucose-6-phosphate isomerase, G6-PI）的生化特性，本研究对其基因进行了克隆和原核表达。根据NCBI已公布的E. tenella Houghton株G6-PI的基因序列（GI：298161921）设计特异性引物，运用RT-PCR方法扩增EtG6-PI基因序列，并将其克隆到表达载体pColdI、pCold43a中，构建重组质粒pColdI-EtG6-PI、pCold43a-EtG6-PI，经测序鉴定正确后，将其转化感受态细胞E.coli Rosetta (DE3)，并进行IPTG诱导表达。结果表明， E. tenella G6-PI的ORF序列（1650 bp），编码550个氨基酸；重组菌pColdI-EtG6-PI、pCold43a-EtG6-PI均能成功诱导表达，其中pCold43a-EtG6-PI表达部分可溶性蛋白，表达产物纯化后可用于酶生化特性分析。柔嫩艾美耳球虫G6-PI基因的成功克隆表达为该酶的功能研究奠定了基础。
柔嫩艾美耳球虫、葡萄糖-6-磷酸异构酶、克隆、原核表达
S852.723(动物医学（兽医学）)
国家自然科学基金项目31201902；31302087；珠江科技新星项目2012J2200059；广东省重点实验室建设支撑项目2012A061100006；广东省对外科技合作项目2011B050700007
2014-04-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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72-77
