乙型脑炎病毒NS1'蛋白编码框的扩展对病毒毒力的影响

摘要：

通过分析乙型脑炎病毒（Japanese encephalitis virus，JEV）基因组中核糖体移码序列，在对NS2A基因实施同义突变基础上，设计2组引物，通过PCR突变方法，依次删除移码后NS1'基因开放阅读框的终止密码子，并将突变片段替换JEV感染性克隆pJEHEN中相应片段，获得了2株突变全长克隆。经体外转录合成RNA，再以RNA转染细胞，拯救出两株突变病毒vJET1和vJET2。通过RT-PCR扩增突变病毒中含突变位点的基因组片段，测序证实了vJET1基因组3690位核苷酸存在由T向A的突变， vJET2基因组3690位和3819位核苷酸均存在由T向A的突变。将vJET1和vJET2感染Vero细胞后，Western blot检测显示，两株突变病毒表达的NS1'蛋白均出现延长现象。生长曲线显示，与亲本病毒vTHen相比，突变病毒增殖速度均出现下降。动物实验显示，与vTHen相比，vJET1和vJET2对小鼠的神经毒力与神经侵袭力也出现下降。上述结果表明，NS1'编码框的延伸降低病毒在体外培养细胞上的增值速度，也减弱了病毒对小鼠的毒力。

关键词：乙型脑炎病毒、NS1’、突变、毒力

分类号：S852.659.6(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然基金青年基金项目31201917；上海市自然基金项目11ZR1446200

在线出版日期：2014-04-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：27-31