miR-150-5p在卵巢癌中的表达及其生物学功能研究

摘要：

目的 探讨微小RNA-150-5p(miR-150-5p)在卵巢癌组织中的表达水平及其通过磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路对卵巢癌细胞增殖和凋亡能力的影响.方法 选取2016年4月—2018年12月于武警上海总队医院妇科就诊的82例卵巢癌患者作为研究对象,患者年龄22～65周岁,平均(43.5±6.8)岁.采用qRT-PCR检测病变组织及其相应癌旁组织中miR-150-5p的表达水平.以人卵巢癌SKOV3细胞株作为空白对照组,转染miR-150-5p抑制剂的人卵巢癌SKOV3细胞株作为miR-150-5p抑制剂组,转染阴性对照质粒的人卵巢癌SKOV3细胞株作为阴性对照组,MTT法检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡,生物信息学网站Targetscan预测miRNA-150-5p与PI3K的靶向结合情况,荧光素酶试验验证miR-150-5p与PI3K的靶向关系,Western blotting检测Cleaved caspase-3、PI3K、Akt、磷酸化蛋白激酶B(Phosphorylated protein kinase,p-Akt)p-Akt蛋白的表达.结果 82例卵巢癌患者病变组织及相应癌旁组织中miR-150-5p的相对表达水平分别为(1.64±0.10)和(0.99±0.08),差异有统计学意义;空白对照组和阴性对照组中miR-150-5p的表达差异无统计学意义,miR-150-5p抑制剂组中miR-150-5p的相对表达量为(0.11±0.03),明显低于空白对照组和阴性对照组,差异有统计学意义.空白对照组和阴性对照组24 h、48 h和72 h细胞增殖率的差异无统计学意义,而miR-150-5p抑制剂组24 h、48 h和72 h细胞增殖率的差异分别为(9.61±1.32)％、(24.54±3.61)％和(33.78±3.72)％,同一时间点均明显低于空白对照组和阴性对照组,差异有统计学意义.空白对照组和阴性对照组48 h细胞凋亡率的差异无统计学意义,而miR-150-5p抑制剂组的细胞凋亡率为(16.65±2.93)％,明显高于空白对照组[(0.74±0.10)％]和阴性对照组[(1.79±0.21)％],差异有统计学意义.荧光素酶报告基因分析证实miR-150-5p与PI3K存在靶向结合位点.miR-150-5p抑制剂组PI3K、p-Akt蛋白表达低于空白对照组和阴性对照组,差异有统计学意义;Cleaved caspase3蛋白表达高于空白对照组和阴性对照组(P<0.01);结论 miR-150-5p在卵巢癌中作促癌基因,其调控作用可能与PI3K/Akt信号通路有关.

关键词：卵巢癌、微小RNA-150(miR-150-5p)、PI3K/Akt信号通路、增殖、凋亡

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在线出版日期：2020-07-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：335-340