基于Caspase-1/GSDMD通路探讨加味苇茎汤对巨噬细胞焦亡模型干预作用

摘要：

目的:探讨加味苇茎汤对RAW264.7巨噬细胞焦亡模型干预作用,以及对胱天蛋白酶-1(Caspase-1)/消皮素D(GSDMD)焦亡通路的影响.方法:采用脂多糖(LPS)刺激RAW264.7细胞模拟巨噬细胞焦亡模型.空白组给予空白血清,加味苇茎汤组分别给予不同体积分数的加味苇茎汤含药血清,培养24 h,细胞增殖与活性检测法(CCK-8)检测LPS对RAW264.7细胞增殖活性的影响和不同浓度含药血清对细胞活力的影响,扫描电镜观察各组细胞的焦亡情况,相差显微镜观察各组细胞形态,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组细胞中核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、Caspase-1、GSDMD mRNA和蛋白表达情况,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测各组细胞中白细胞介素(IL)-18和IL-1β的表达情况.结果:电镜观察RAW264.7细胞,空白组细胞形态和结构最好,与空白组比较,模型组细胞明显焦亡,部分细胞内容物释放至胞外;与模型组比较,各干预组细胞焦亡状态均有不同程度减轻,其中高剂量组最接近空白组.光镜观察各组细胞形态,空白组细胞基本呈圆形,与空白组比较,模型组细胞形态不规则,大部分长触角,与模型组比较,加味苇茎汤组形态均有改善,其中加味苇茎汤组(20％)最接近空白组.与空白组比较,模型组NLRP3、Caspase-1、GSDMD mRNA和蛋白的表达升高(P＜0.05),与模型组比较,加味苇茎汤组上述指标表达有明显降低(P＜0.05).与空白组比较,模型组细胞IL-18、IL-1β表达明显升高(P＜0.05);与模型组比较,加味苇茎汤组(10％、20％)细胞IL-18、IL-1β的表达显著降低(P＜0.01).结论:加味苇茎汤可能通过下调Caspase-1/GSDMD通路抑制巨噬细胞焦亡,减少炎症因子的释放,发挥治疗非精酒性脂肪性肝炎的作用.

关键词：加味苇茎汤、非酒精性脂肪性肝炎、巨噬细胞、焦亡、抗炎作用

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分类号：R2-0;R22;R242;R285.5

资助基金：国家自然科学基金;河南省中医药科学研究专项;全国名中医工作室建设项目;河南省中医学双一流创建科学研究专项;河南省中医学双一流创建科学研究专项;河南省科技攻关计划项目

在线出版日期：2024-05-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：27-33