从MAPKs信号通路探讨健脾通络方的消肿镇痛作用机制

摘要：

目的:观察健脾通络方的消肿和镇痛作用,并初步探索其作用机制.方法:120只ICR小鼠,分为正常组、模型组、健脾通络方低、中、高剂量组(5、10、20 g·kg-1)、阳性药塞来昔布组(0.03 g·kg-1),每组10只,每天1次经口灌服,采用小鼠完全弗氏佐剂(CFA)诱导慢性炎性痛模型、二甲苯诱导耳肿胀实验、热板实验和乙酸扭体实验4种急、慢性模型观察不同剂量的健脾通络方的消肿和镇痛作用;采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测慢性炎性痛小鼠血清和致炎足中前列腺素E2(PGE2)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测慢性炎性痛小鼠致炎足中水通道蛋白(AQP)1、AQP3、环氧化酶(COX)1、COX2、丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)家族的蛋白表达情况,探索健脾通络方的初步作用机制.结果:与正常组比较,二甲苯所致模型小鼠耳肿胀度显著升高,热板实验小鼠热缩足潜伏期缩短(P＜0.01);与模型组比较,健脾通络方能显著提高二甲苯所致小鼠耳肿胀度抑制率(P＜0.05,P＜0.01),延长小鼠乙酸致扭体潜伏期和减少扭体反应次数(P＜0.05,P＜0.01).与正常组比较,慢性炎性痛小鼠足肿胀度显著升高,机械痛阈值降低同时冷敏痛阈值升高(P＜0.05,P＜0.01),致炎足中的AQP1和AQP3的蛋白含量增加,血清和(或)致炎足中IL-1β、1L-6、TNF-α、PGE2及致炎足COX2含量升高,致炎足p-p38 MAPK、p-JNK、p-ERK的蛋白表达水平升高(P＜0.01);与模型组比较,健脾通络方显著降低慢性炎性痛小鼠的足肿胀度、升高机械痛阈值并降低冷敏痛阈值,镇痛持续4 h,且给药后2 h为镇痛最佳时间点(P＜0.05,P＜0.01);进一步,健脾通络方下调慢性炎性痛小鼠致炎足中AQP1和AQP3的蛋白含量,降低血清和(或)致炎足中IL-1β、IL-6、TNF-α、PGE2及致炎足COX2含量,但对COX1无明显影响,同时降低致炎足p-p38 MAPK、p-JNK、p-ERK的蛋白表达水平(P＜0.05,P＜0.01).结论:健脾通络方具有消肿和镇痛作用,其机制与下调MAPKs信号通路抑制细胞因子和炎症介质产生有关,为其临床应用提供实验依据.

关键词：健脾通络方、消肿、镇痛、抗炎、水通道蛋白、炎症介质、丝裂原活化蛋白激酶

所属期刊栏目：29

分类号：R2-0;R33;R289;R684.3

资助基金：中国中医科学院科技创新工程重大攻关项目;国家重大新药创制科技重大专项

在线出版日期：2023-06-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：85-93