霍山石斛多糖调控NLRP3炎症小体对帕金森病模型神经炎性损伤的抑制作用

摘要：

目的:研究霍山石斛多糖(DHP)对帕金森病(PD)模型神经元炎性损伤的抑制机制.方法:将SH-SY5Y细胞分为空白组、模型组和DHP组,噻唑蓝(MTT)比色法检测干预后各组SH-SY5Y细胞存活率,比色分析法检测细胞乳酸脱氢酶(LDH)、活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)的水平;将小胶质细胞(BV-2)分为空白组、模型组、DHP组和MCC950组(对照组),应用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-18(IL-18)含量;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测NOD样受体蛋白3(NLRP3)、接头蛋白凋亡相关的点状蛋白(ASC)、胱天蛋白酶-1(Caspase-1)及IL-1β蛋白的表达量.C57BL/6小鼠设置空白组、模型组、DHP低剂量(100 mg·kg-1)组、DHP高剂量(350mg·kg-1)组及MCC950组(对照组),每组10只.通过平衡木实验、悬挂实验和转棒实验观察小鼠运动平衡和协调能力;免疫荧光染色法检测小鼠中脑黑质小胶质细胞Iba-1和酪氨酸羟化酶(TH)表达水平;FJB染色检测中脑黑质多巴胺神经元损伤情况;ELISA检测小鼠中脑组织IL-1β、IL-18和TNF-α等炎症因子表达水平;Western blot检测NLRP3、ASC、Caspase-1和IL-1β蛋白表达水平.结果:与空白组比较,模型组细胞存活率降低,LDH、ROS和MDA水平升高(P＜0.05),SOD水平降低(P＜0.05);与模型组比较,DHP组细胞存活率升高,LDH、ROS和MDA水平降低(P＜0.01),SOD水平升高(P＜0.01).与空白组比较,BV-2细胞模型组炎症因子IL-1β、IL-18和TNF-α水平升高(P＜0.05),NLRP3、Caspase-1、IL-1β及ASC蛋白表达增多(P＜0.05);与模型组比较,DHP 组及 MCC950 组炎症因子 IL-1β、IL-18 和 TNF-α 水平降低(P＜0.01),NLRP3、Caspase-1、IL-1β 及ASC蛋白表达减少(P＜0.01).与空白组比较,模型组小鼠通过平衡木时间增多(P＜0.05),转棒实验在棒时间减少(P＜0.05),IL-1β、IL-18和TNF-α水平升高(P＜0.05),Iba-1表达增多(P＜0.05),TH表达水平降低(P＜0.05),中脑黑质神经元阳性细胞数增多(P＜0.05),NLRP3、Caspase-1、ASC及IL-1β蛋白表达增多(P＜0.05);与模型组比较,DHP组及MCC950组小鼠通过平衡木时间减少(P＜0.01),转棒实验中在棒时间增多(P＜0.01),中脑炎症因子IL-1β、IL-18和TNF-α水平降低(P＜0.01),中脑黑质Iba-1表达减少(P＜0.01),TH表达水平升高(P＜0.01),FJB染色中脑黑质神经元阳性细胞数减少(P＜0.01),MCC950组NLRP3、ASC及IL-1β蛋白降低(P＜0.01),DHP高剂量组NLRP3、ASC、Caspase-1及IL-1β蛋白降低(P＜0.01).结论:DHP具有抗氧化应激作用;DHP可能通过调控NLRP3炎症小体表达,抑制小胶质细胞过度活化,进而降低PD模型神经炎性损伤,发挥神经保护作用.

关键词：帕金森病、霍山石斛多糖、氧化应激、神经炎症、NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体

所属期刊栏目：29

分类号：R2-0;R33;R289;R742

资助基金：安徽省自然科学基金;安徽中医药大学神经病学研究所临床专项基金项目

在线出版日期：2023-05-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：97-105