基于Cx43/Glu/AMPAR通路探讨加减薯蓣丸对血管性痴呆大鼠海马髓鞘损伤的影响

摘要：

目的:探讨加减薯蓣丸对血管性痴呆(VD)模型大鼠海马髓鞘损伤的影响及其作用机制研究.方法:选取SPF级SD雄性大鼠60只,随机分为假手术组,模型组,加减薯蓣丸高、中、低剂量组,每组12只.除假手术组外,其余4组均采用双侧颈动脉结扎改良法进行VD模型制备,造模结束后通过水迷宫筛选造模成功大鼠进行灌胃.加减薯蓣丸高、中、低剂量组灌胃剂量分别为10、5、2.5 g·kg-1·d-1,其余组给予等体积生理盐水.28d灌胃结束后,通过水迷宫检测大鼠空间学习记忆能力,苏木素-伊红(HE)染色法观察海马区神经元结构,生化检测海马肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、谷氨酸(Glu)含量变化,免疫荧光检测海马髓鞘碱性蛋白(MBP)、活化星形胶质细胞标记物胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、半通道蛋白43(Cx43)的表达,电镜观察大鼠海马髓鞘结构,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测海马α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异恶唑丙酸受体(AMPAR)、Cx43蛋白表达.结果:与假手术组比较,VD模型大鼠逃避潜伏期显著延长(P＜0.01),穿越原平台次数和目标象限滞留时间百分比显著减少(P＜0.01);海马CA1区神经元结构紊乱;髓鞘板层疏松,边缘模糊不清;海马CA1区神经元TNF-α、IL-6、Glu含量明显增多,以Glu最为显著(P＜0.01);AMPAR蛋白表达显著降低(P＜0.01),磷酸化(p)-AMPAR、Cx43蛋白表达显著升高(P＜0.01);髓鞘MBP蛋白表达显著降低,GFAP与Cx43共标荧光显著增强.与模型组比较,给予加减薯蓣丸干预后,加减薯蓣丸中药组逃避潜伏期明显缩短(P＜0.05),穿越原平台次数和目标象限滞留时间百分比明显延长(P＜0.05);海马神经元排列较紧密;髓鞘板层更致密,边缘清晰;海马TNF-α、IL-6、Glu含量明显降低,Glu下降最为显著(P＜0.01);AMPAR蛋白表达显著升高(P＜0.01),p-AMPAR、Cx43蛋白表达显著降低,以高剂量组最为显著(P＜0.01);髓鞘MBP蛋白表达显著增加,GFAP与Cx43共标荧光显著降低、高剂量组改善最为明显.结论:加减薯蓣丸能改善VD大鼠学习记忆能力,其机制可能与抑制Cx43表达,减少Glu外排,抑制AMPAR介导的炎性反应并减少星形胶质细胞标记物GFAP产生,促进髓鞘MBP蛋白表达,缓解髓鞘损伤有关.

关键词：半通道蛋白43(Cx43)、髓鞘损伤、血管性痴呆、加减薯蓣丸

所属期刊栏目：29

分类号：R2-0;R33;R289;R22;R74

资助基金：湖北省自然科学基金重点项目;湖北省中医院老年呆病五专项目

在线出版日期：2023-04-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：38-46