10.13422/j.cnki.syfjx.20221704
黄芩汤对LPS诱导的RAW264.7炎症细胞的抗炎作用
目的:以RAW264.7细胞为炎症模型,探究黄芩汤的抗炎作用机制.方法:制备黄芩汤,筛选对RAW264.7细胞的安全剂量;将RAW264.7细胞接种于24孔板中,先后加入黄芩汤和脂多糖(LPS),分别采用Griess法和酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定一氧化氮(NO)和白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、前列腺素E2(PGE2)的含量;将RAW264.7细胞接种于6孔板中,设空白组、LPS组、LPS+黄芩汤组、核转录因子-κB p65(NF-κB p65)抑制剂(PDTC)组、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)抑制剂(SB203580)组、细胞外信号调节激酶(ERK)抑制剂(PD98059)组、c-Jun氨基末端激酶(JNK)抑制剂(SP600125)组、Janus酪氨酸蛋白激酶(JAK)抑制剂(AG490)组,先后加入相应的抑制剂和黄芩汤,并经LPS刺激后,提取RNA和蛋白,分别采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测NF-κB p65、p38 MAPK、ERK、JNK和JAK mRNA及蛋白的表达水平,探究黄芩汤通过调控NF-κB、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)和JAK/信号转导及转录激活因子(STAT)信号通路发挥抗炎作用的机制.结果:与空白组比较,LPS刺激后,模型组细胞中NO、IL-6、TNF-α、PGE2的浓度明显增加(P＜0.05,P＜0.01),与模型组比较,加入黄芩汤后,NO、IL-6、TNF-α、PGE2分泌量有减少趋势(P＜0.05,P＜0.01);与空白组比较,模型组细胞内p38 MAPK、ERK、JNK、JAK和NF-κB p65 mRNA及总蛋白表达明显升高(P＜0.05,P＜0.01),与模型组比较,黄芩汤孵育后,炎症细胞内p38MAPK、ERK、JNK、JAK和NF-KB p65总蛋白及mRNA的表达明显降低(P＜0.05,P＜0.01);同时各抑制剂组细胞内NF-κB p65总蛋白及mRNA表达均有下降趋势(P＜0.05,P＜0.01).结论:黄芩汤能够通过NF-κB、MAPK和JAK/STAT信号通路抑制炎症反应.
黄芩汤、炎症、核转录因子-κB(NF-κB)信号通路、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路、Janus酪氨酸蛋白激酶(JAK)/信号转导及转录激活因子(STAT)信号通路
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R2-0;R22;R285.5;R289;R33
国家自然科学基金;国家自然科学基金;国家自然科学基金
2023-04-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共9页
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