红花口服液缓解神经病理性疼痛的分子机制

摘要：

目的:考察红花口服液(HOL)缓解神经病理性疼痛(NP)的药效作用特点并探究其分子作用机制.方法:基于脊神经结扎(SNL)大鼠模型,将健康雄性SD大鼠随机分为假手术组,模型组,HOL低、中、高剂量组(0.5、1.0、2.0 mL·kg-1·d-1)及阳性药普瑞巴林组(25mg·kg-1·d-1),每组6只.在脊神经结扎手术恢复3d后,连续灌胃给药14d并采集样本.期间检测各组大鼠的机械痛阈值和冷痛阈值,考察HOL的镇痛作用特点.将假手术组、模型组、HOL高剂量组的海马组织样本进行转录组测序,获取不同组别之间的差异表达基因,并进行通路富集分析,进而,选择与NP密切相关的靶标进行验证,进一步通过分子对接寻找HOL关键活性成分与靶标分子的具体结合位点.此外,检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-10(IL-10)的表达水平,评价HOL对NP大鼠的影响.结果:与假手术组比较,模型组大鼠的机械痛阈值及冷痛阈值均明显降低(P＜0.05).与模型组比较,HOL组可有效升高其机械痛阈值及冷痛阈值(P＜0.05);转录组分析发现,模型组与假手术组比较共有376个差异表达基因,其中上调基因124个、下调基因252个,模型组与HOL组比较共有194个差异表达基因,其中上调基因33个、下调基因161个.其中,类胰岛素一号生长因子(IGF1)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-14(MMP-14)、酪氨酸激酶受体2(ERBB2)和整合素A5(ITGA5)与NP密切相关.实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)结果显示,与假手术组比较,模型组大鼠海马中上述各分子的mRNA表达量均显著升高(P＜0.01).与模型组比较,HOL组可有效降低其mRNA表达量(P＜0.01).分子对接结果显示,红花主要活性成分羟基红花黄色素A、山奈酚和槲皮素与上述靶标分子IGF1、MMP-2、MMP-14、ERBB2、ITGA5的氨基酸残基形成稳定的氢键作用力.酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测结果显示,与假手术组比较,模型组大鼠血清中TNF-α/IL-10表达失衡(P＜0.01),与模型组比较,HOL组可显著减少促炎细胞因子TNF-α的含量(P＜0.01),增加抗炎细胞因子IL-10的含量(P＜0.05).结论:HOL对SNL大鼠具有镇痛作用,其机制与抑制神经炎症密切相关.

关键词：红花口服液、神经病理性疼痛、胰岛素样生长因子、基质金属蛋白酶、酪氨酸激酶受体2、整合素A5

所属期刊栏目：29

分类号：R2-0;R33;R289;R322.8

资助基金：国家自然科学基金;中央级公益性科研院所基本科研业务费专项;中华中医药学会青年人才托举工程项目;北京市自然科学基金青年基金项目

在线出版日期：2023-03-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：222-230