基于NF-κB通路探讨芪红通络方对深静脉血栓形成大鼠血管内皮细胞的保护作用

摘要：

目的:探讨芪红通络方对深静脉血栓形成(DVT)大鼠血管内皮细胞的保护作用与机制.方法:取66只SD大鼠采用随机数字表分为空白组(11只)、建模组(55只),后者通过减慢血流+损伤血管内皮建立DVT模型,并将建模成功大鼠按照随机数字表分为模型组,阿司匹林组,芪红通络方低、中、高剂量组.阿司匹林组予以200 mg·kg-1阿司匹林灌胃,芪红通络方低、中、高剂量组分别予以6.5、13、26 g·kg-1芪红通络方流浸膏灌胃,模型组和空白组分别予以生理盐水灌胃,每天1次,连续7d.处死大鼠,取腹主动脉血采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清内皮素-1(ET-1)、白细胞介素-6(IL-6)水平;苏木素-伊红(HE)染色观察血管内皮组织病理改变;透射电镜观察血管内皮细胞超微结构;噻唑蓝(MTT)比色法检测血管内皮细胞活力、乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测血管内皮细胞LDH释放水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测血管内皮组织血小板活化因子(PAF)、核转录因子-KB(NF-κB)、Ras相关的C3肉毒素底物1(Rac1)、Ras相关的C3肉毒素底物2(Rac2)mRNA表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测血管内皮组织PAF、NF-KB、Rac1、Rac2蛋白表达.结果:模型组血管内皮细胞严重损伤并大量脱落,细胞肿胀明显,有大量炎性细胞附着,电镜下可见胞核固缩变形,线粒体高度肿胀,胞质空泡化严重,内弹力膜暴露;芪红通络方各剂量组和阿司匹林组血管内皮组织及其超微结构损伤均有不同程度改善.与空白组比较,模型组血清ET-1、IL-6水平、血管内皮细胞活力、血管内皮组织PAF、NF-KB、Rac1、Rac2 mRNA和蛋白表达明显升高,血管内皮细胞LDH释放水平降低,差异均有统计学意义(P＜0.05);与模型组比较,阿司匹林组和芪红通络方各剂量组血清ET-1、IL-6水平、血管内皮细胞活力、血管内皮组织PAF、NF-KB、Rac1、Rac2 mRNA和蛋白表达均降低,血管内皮细胞LDH释放水平升高,差异均有统计学意义(P＜0.05),其中芪红通络方的作用呈剂量依赖性.结论:芪红通络方对DVT大鼠血管内皮细胞有保护作用,能防治血栓的形成,推测是通过抑制PAF、NF-κB、Rac1和Rac2的表达,降低血清ET-1、IL-6的水平实现的.

关键词：芪红通络方、深静脉血栓形成、血管内皮细胞、血小板活化因子、核转录因子-κB、Ras相关的C3肉毒素底物1、Ras相关的C3肉毒素底物2、补阳还五汤

所属期刊栏目：29

分类号：R22;R242;R2-031;R285.5;R543.6(中医基础理论)

资助基金：河北省中医药管理局科研计划项目2019021

在线出版日期：2023-03-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：60-68