三物白散含药血清通过TGF-β/Smad通路抑制TGF-β1诱导的人胃癌SGC-7901细胞上皮间质转化

摘要：

目的:基于转化生长因子-β/Smad(TGF-β/Smad)信号通路,体外研究三物白散含药血清对TGF-β1诱导的人胃癌SGC-7901细胞上皮间质转化(EMT)的影响及其机制.方法:SPF级3月龄雄性SD大鼠28只,随机分为空白组及三物白散低、中、高剂量组,每组7只,三物白散低、中、高剂量组分别按0.031 25、0.062 5、0.125g·kg-1·d-1的剂量灌胃,空白组以等体积超纯水灌胃.每日1次,连续7d.末次给药后45 min经腹主动脉取含药血清;细胞增殖与活性检测(CCK-8)法检测三物白散高剂量组含药血清对SGC-7901细胞活性的影响;镜下观察经TGF-β1和三物白散含药血清处理后的细胞形态变化;细胞划痕实验和Transwell实验分别检测经TGF-β1诱导和三物白散低、中、高剂量组含药血清处理后SGC-7901细胞的迁移率和侵袭率;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞E-钙黏蛋白(E-cadherin)、Snail、TGF-β1、Smad3、磷酸化(p)-Smad3、Smad7蛋白的表达.结果:与空白组比较,10％、15％、20％三物白散高剂量组含药血清可呈浓度-时间依赖性抑制SGC-7901细胞活性;与空白组比较,模型组细胞失去梭形形态,多数细胞变圆、变长;与模型组比较,各药物组细胞伪足减少,细胞变小且形态恢复正常;与空白组比较,模型组细胞迁移和侵袭能力增强(P＜0.01);与模型组比较,三物白散中、高剂量组处理SGC-7901细胞24 h后能显著抑制其迁移能力(P＜0.01);三物白散低、中、高剂量组处理SGC-7901细胞48 h后均能显著抑制其迁移能力(P＜0.01);与模型组比较,三物白散低、中、高组剂量组均能显著抑制其侵袭能力(P＜0.01);与空白组比较,模型组E-cadherin及Smad7蛋白的表达水平显著降低(P＜0.01),Snail、p-Smad3、TGF-β1蛋白的表达水平显著升高(P＜0.01),Smad3总蛋白水平不变;与模型组比较,三物白散高剂量组E-cadherin蛋白显著增加(P＜0.01)、三物白散中剂量组有明显上升(P＜0.05);Smad7蛋白三物白散中、高剂量组表达水平显著增加(P＜0.01);三物白散中、高剂量组Snail蛋白表达水平显著降低(P＜0.01);三物白散低、中、高组TGF-β1、p-Smad3蛋白表达水平均显著降低(P＜0.01).三物白散含药血清可以有效地逆转TGF-β1诱导的人胃癌SGC-7901细胞EMT,并可能通过TGF-β/Smad信号通路发挥作用.结论:三物白散能抑制TGF-β1诱导的SGC-7901细胞EMT的发生,其机制可能与调控TGF-β/Smad信号通路有关.

关键词：胃癌、上皮间质转化、三物白散、转化生长因子-β/Smad信号通路、中医药

所属期刊栏目：28

分类号：R22;R242;R2-031;R285.5(中医基础理论)

资助基金：国家自然科学基金;国家自然科学基金;江苏高校优势学科建设工程中西医结合项目

在线出版日期：2022-11-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：66-73