丹参-葛根提取物对氧糖剥夺/复氧损伤人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞的保护作用

摘要：

目的:基于氧化应激和凋亡探究丹参-葛根提取物对氧糖剥夺/复氧(OGD/R)损伤SH-SY5Y细胞的保护作用.方法:采用水提法制备不同配伍比例丹参-葛根提取物,体外培养人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞并建立OGD/R损伤模型,采用细胞增殖与活性检测(CCK-8)法筛选最佳配伍比例提取物用于后续实验.将SH-SY5Y细胞分为空白组、OGD/R组和丹参-葛根(SP)提取物低、中、高剂量组(10、30、100 mg·L-1),除空白组外,其余各组细胞在氧糖剥夺4 h后迅速复氧12 h进行OGD/R造模.采用CCK-8法检测细胞存活率,显微条件下观察细胞形态,分光光度计法检测乳酸脱氢酶(LDH)释放率、超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)含量,2,7-二氯二氢荧光素二乙酸酯荧光探针法(DCFH-DA)检测细胞活性氧(ROS)水平,JC-1法检测线粒体膜电位,Hoechst 33342染色法观察细胞核形态,流式细胞术结合异硫氰酸荧光素/碘化丙啶(Annexin V-FITC/PI)双染检测细胞凋亡.结果:丹参-葛根2:1配伍时SH-SY5Y细胞的存活率最佳,与空白组比较,OGD/R组细胞形态破损,细胞上清液LDH释放率、细胞ROS水平和MDA含量显著升高(P＜0.01),SOD活性和GSH水平显著降低(P＜0.01),线粒体膜电位下降,细胞凋亡率升高(P＜0.01);与OGD/R组比较,SP提取物各给药组可呈浓度依赖性地提高细胞存活率,改善细胞形态,降低细胞上清液LDH释放率(P＜0.01);SP提取物30、100 mg·L-1组可明显降低细胞内ROS水平,明显提高细胞中SOD活性和GSH水平(P＜0.05,P＜0.01),100 mg·L-1可明显降低细胞内MDA含量(P＜0.05);此外,丹参-葛根提取物给药后可提高线粒体膜电位,30、100mg·L-1可显著降低细胞凋亡率(P＜0.01).结论:丹参-葛根提取物2:1配伍对OGD/R损伤的SH-SY5Y细胞有较好的保护作用,这可能与其降低细胞氧化损伤,抑制细胞凋亡相关.

关键词：缺血性脑卒中、氧糖剥夺/复氧模型、丹参-葛根药对、氧化应激、细胞凋亡

所属期刊栏目：28

分类号：R2-0;R22;R285.5;R289;R33

资助基金：国家自然科学基金81473586

在线出版日期：2022-10-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：24-33