地龙(参环毛蚓)配方颗粒的位点特异性PCR鉴别

摘要：

目的:为保障临床用药的安全性和有效性,建立地龙(参环毛蚓)药材及其加工制品混伪、掺假特异性聚合酶链式反应(PCR)鉴定方法.方法:根据地龙氧化酶亚基1(CO Ⅰ)基因序列筛选出地龙配方颗粒的稳定引物区间,并根据区间内筛选获得地龙的特异性单核苷酸多态性(SNP)位点,根据SNP位点设计地龙特异性鉴别引物dlshmy-F及dlshmy-R,分别采集地龙及其混伪品,建立地龙配方颗粒特异性PCR鉴别方法并优化PCR反应体系,对该方法进行耐受性和适用性考察.结果:退火温度为62℃,循环次数为36次,地龙及其配方颗粒经PCR反应及凝胶电泳后,可在约170 bp处观察到单一明亮的特异性鉴别条带,其他近源伪品如通俗环毛蚓、保宁腔蚓、栉盲环毛蚓等20种伪品及阴性对照均无条带.结论:该研究建立的特异性PCR鉴别方法可快速准确的鉴别出地龙药材、配方颗粒、冻干粉中的参环毛蚓源性成分,准确鉴定出全国广地龙中药材及饮片以及地龙的基原,也可为其他的中药配方颗粒质量标准研究提供了参考.

关键词：地龙(参环毛蚓)、配方颗粒、聚合酶链式反应

所属期刊栏目：28

分类号：R284.2;R289;R22;R2-031;R33(中药学)

资助基金：中国中医科学院科技创新工程重大攻关项目;东城区优秀人才培养项目;青年岐黄学者项目

在线出版日期：2022-09-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：119-126