快速筛选高纯合度天麻PCR-RFLP鉴定方法

摘要：

目的:建立一种快速筛选高纯合度天麻种质材料的方法,为其纯系育种和杂交育种奠定基础.方法:以本课题组前期天麻全基因组测序和群体重测序为基础,利用单核苷酸多态性(SNP)位点开发20个限制性内切酶片段长度多态性(RFLP)标记,并采用聚合酶链式反应(PCR)-RFLP法对15份天麻种质的20个RFLP标记进行限制性内切酶实验,根据20个RFLP标记位点酶切条带数目,计算15份天麻种质的纯合度,进而对天麻种质纯合度进行评估;在此基础上,利用基因组重测序技术对评估结果进行验证.结果:利用PCR-RFLP法筛选获得10份纯合度＞95％的种质材料,其中3份种质材料的纯合度为95％,7份种质材料的纯合度为100％;利用基因组重测序法筛选获得9份纯合度＞95％的种质材料,其中8份种质材料与PCR-RFLP法检测结果一致.结论:该文所建立的用于筛选高纯合度天麻种质的PCR-RFLP法精确度为80％,准确率为89％.该方法实验操作简便、检测效率高,且成本显著低于基因组重测序技术,为天麻纯系育种提供了技术支撑,也为其他中药材品种选育研究提供了借鉴.

关键词：天麻、单核苷酸多态性(SNP)位点、限制性内切酶片段长度多态性(RFLP)标记、纯合度

所属期刊栏目：28

分类号：R284.2;R289;R22;R2-031;R33(中药学)

资助基金：国家自然科学基金;国家自然科学基金;中国中医科学院科技创新工程重大攻关项目;国家科技性基础资源调查专项;中央本级重大增减支项目;青年岐黄学者项目;东城区优秀人才培养项目

在线出版日期：2022-09-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：113-118