附子汤对类风湿性关节炎滑膜成纤维细胞MH7A增殖和miR-155表达的影响

摘要：

目的:观察附子汤对类风湿性关节炎滑膜成纤维细胞MH7A增殖的影响,研究附子汤对miR-155表达的影响并进一步探讨其抗类风湿性关节炎的作用机制.方法:体外培养MH7A细胞,设空白组、附子汤高剂量组(25 g·L-1)、低剂量组(12.5g·L-1)和硫酸羟氯喹阳性药组(0.006 25 g·L-1),采用细胞增殖与活性检测(CCK-8)试剂盒法检测细胞增殖,流式细胞术检测MH7A细胞周期的改变;应用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)法检测药物处理后miR-155及其下游基因含SH2结构域的肌醇5-磷酸酶-1(SHIP-1)、蛋白激酶B3(Akt3)和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)mRNA表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、Akt3和mTOR的蛋白表达.结果:附子汤体外在质量浓度6.25 g·L-1以上时,能明显抑制MH7A增殖,且呈明显的量-效关系和时-效关系.与空白组比较,附子汤高、低剂量组G2/M期细胞比例均明显增加(P＜0.05),高剂量组G0/G1期细胞比例明显降低(P＜0.05),其细胞周期的阻滞作用呈明显的量效关系.与空白组比较,附子汤高、低剂量组miR-155的表达均明显下调(P＜0.05);附子汤高剂量组SHIP1 mRNA表达明显上调、Akt3 mRNA表达明显下调(P＜0.05),附子汤高、低剂量组mTOR mRNA表达均明显下调(P＜0.05).与空白组比较,附子汤高、低剂量组的PI3K、Akt3和mTOR的蛋白表达均明显下调(P＜0.05).结论:附子汤对MH7A细胞增殖具有显著的抑制作用,作用机制与下调miR-155的表达,从而促进SHIP-1的表达,抑制其下游PI3K/Akt3/mTOR信号通路的基因表达有关.

关键词：附子汤、类风湿性关节炎、MH7A细胞、miR-155、肌醇5-磷酸酶-1(SHIP-1)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B3(Akt3)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路

所属期刊栏目：28

分类号：R2-0;R22;R285.5;R289;R33

资助基金：广州市科技计划重点项目202002020057

在线出版日期：2022-07-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：29-35