六味地黄汤促进自噬调控小胶质细胞表型减轻糖尿病抑郁大鼠ACC髓鞘损伤及抑郁行为

摘要：

目的:观察六味地黄汤对糖尿病抑郁(DD)大鼠抑郁样行为的影响,并探讨其作用机制.方法:50只SPF级雄性SD大鼠采用高脂饮食喂养加尾静脉注射小剂量链脲佐菌素(STZ)的方法制备糖尿病模型,随后糖尿病大鼠予28 d慢性不可预测的轻度应激(CUMS)的方法建立DD模型.随机分为5组,分别为模型组、氟西汀组(氟西汀10 mg·kg-1·d-1)、六味地黄汤低、中、高剂量组(3.375、6.75、13.5 g·kg-1·d-1),每组10只.另取正常组10只,生理盐水灌胃.连续灌胃4周后,强迫游泳实验用于评估大鼠的抑郁表型,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测前扣带回皮层(ACC)肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-10(IL-10)表达水平;免疫荧光检测ACC区髓鞘碱性蛋白(MBP)表达、小胶质细胞离子钙结合衔接分子1(Iba1)与微管相关蛋白1轻链3(LC3)共定位;蛋白免疫印迹法检测ACC区MBP、髓鞘脂蛋白(PLP)、髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG)和Beclin-1、LC3、p62及小胶质细胞(MG)表型相关蛋白诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、精氨酸酶1(Arg1)蛋白表达水平.结果:与正常组比较,模型组大鼠在强迫游泳实验中游泳时间下降、不动时间增加(P＜0.01).与模型组比较,六味地黄汤中、高剂量组不动时间均有不同程度地降低(P＜0.05,P＜0.01).与正常组比较,模型组大鼠ACC区MBP、PLP、MOG蛋白表达降低(P＜0.01);与模型组比较,氟西汀组、六味地黄汤中、高剂量组MBP、PLP、MOG蛋白表达不同程度上调(P＜0.05,P＜0.01).与正常组比较,模型组大鼠ACC区MBP荧光强度显著降低(P＜0.01);与模型组比较,六味地黄汤中、高剂量组和氟西汀组MBP荧光表达强度不同程度地增加(P＜0.05,P＜0.01).与正常组比较,模型组大鼠iNOS表达增加(P＜0.01),Arg1蛋白的表达轻度增加.与模型组相比,六味地黄汤中、高剂量组和氟西汀组iNOS表达下调,Arg1蛋白表达上调(P＜0.05,P＜0.01),氟西汀组与六味地黄汤中、高剂量组之间差异无统计学意义.与正常组比较,模型组大鼠ACC促炎因子IL-1β、TNF-α表达显著增加(P＜0.01),抗炎因子IL-4、IL-10水平轻度增加.与模型组比较,氟西汀组、六味地黄汤中、高剂量组IL-1β、TNF-α表达下调(P＜0.05,P＜0.01),IL-4、IL-10表达水平明显增加(P＜0.05,P＜0.01).与正常组比较,模型组大鼠Beclin-1和LC3Ⅱ蛋白的表达降低(P＜0.01),p62蛋白的表达增加(P＜0.01).与模型组比较,六味地黄汤中、高剂量组和氟西汀组Beclin-1和LC3Ⅱ表达上调(P＜0.01),p62表达下调(P＜0.01);与正常组比较,模型组ACC区LC3+Iba1+细胞数明显减少(P＜0.01):与模型组比较,氟西汀组和六味地黄汤中、高剂量组LC3+Iba1+细胞数不同程度地增加(P＜0.05,P＜0.01).结论:六味地黄汤改善DD大鼠抑郁样行为,其机制可能是通过促进MG自噬,调控MG表型变化,增加MG对髓鞘碎片的清除;同时MG表型转换还抑制DD大鼠ACC炎症水平,改善少突胶质细胞增殖、分化的局部微环境,并最终促进受损髓鞘修复及再髓鞘化.

关键词：糖尿病、抑郁、髓鞘、自噬、小胶质细胞表型、六味地黄汤

所属期刊栏目：28

分类号：R2-0;R22;R285.5;R284;R33

资助基金：湖北省科技创新专项立项项目;武汉市科技计划应用基础前沿项目;武汉市中心医院学科基金项目

在线出版日期：2022-03-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：7-16