芦竹碱对2,4-二硝基氯苯诱导的特应性皮炎小鼠模型的机制

摘要：

目的:探讨芦竹碱对2,4-二硝基氯苯(DNCB)诱导的特应性皮炎(AD)小鼠模型的药效及其潜在作用机制.方法:分别设立正常组,模型组,地塞米松组(0.05 g·kg-1),芦竹碱高、低剂量(0.12,0.06 g·kg-1)组,除正常组外,其余各组均用DNCB刺激.在DNCB刺激后的13d各组给予相应药物,治疗后观察皮损变化,测量各组皮肤厚度、水分含量,皮肤经皮水分丢失(TWEL);苏木素-伊红(HE)染色观察皮损组织病理形态学改变,流式细胞术分析药物对脾脏CD4+/CD8+比值的影响,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清中免疫球蛋白E(IgE),白细胞介素(IL)-4,IL-6水平的变化;微板法检测血清中肝肾功能相关指标丙氨酸氨基转移酶(ALT),天冬氨酸氨基转移酶(AST),血尿素氮(BUN),血清肌酐(CRE)的变化;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测皮损中炎症因子γ-干扰素(IFN-γ),IL-13,IL-17,IL-1β,IL-6和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的mRNA表达水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测皮损中核转录因子-κB(NF-κB)和NF-κB抑制蛋白α(IκBα)的表达.结果:与正常组比较,模型组皮损出现水肿、红斑、结痂伴有搔抓,皮损组织可见淋巴细胞、中性粒细胞浸润,皮损厚度增加,皮肤水分含量降低,经皮水分丢失显著升高(P＜0.01),脾脏指数和脾脏CD4+/CD8+T淋巴细胞的比值明显升高(P＜0.05),皮损组织中IFN-γ,IL-13,IL-17,IL-1β,IL-6和TNF-α的mRNA表达明显升高(P＜0.05),血清中IgE,IL-4,IL-6含量明显升高(P＜0.05),皮损组织中IκBα和NF-κB蛋白表达明显升高(P＜0.05);与模型组比较,地塞米松组和芦竹碱各剂量组皮损红斑、鳞屑及痂均有不同程度的减轻,炎症细胞浸润明显减少,抑制皮肤增厚,升高皮肤水分含量,降低经皮水分丢失,降低脾脏指数和脾脏CD4+/CD8+T淋巴细胞的比值,降低皮损中炎症因子的mRNA表达,降低血清中IgE及炎症因子含量,降低皮损中IκBα和NF-κB蛋白表达,尤其以地塞米松组和芦竹碱高剂量组最为明显(P＜0.05,P＜0.01).结论:芦竹碱能够通过IκBα/NF-κB信号通路抑制相关炎症因子的表达以及调节AD小鼠免疫功能发挥治疗作用,是治疗AD的潜在药物.

关键词：芦竹碱、2、4-二硝基氯苯、小鼠模型、特应性皮炎、免疫调节、炎症因子

所属期刊栏目：28

分类号：R2-0;R285;R33;R246.7

资助基金：国家自然科学基金81903812

在线出版日期：2022-03-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：19-25