益肾通络方对MN大鼠miR-514a-5p/TNFSF15信号通路的影响及机制

摘要：

目的:基于miR-514a-5p/肿瘤坏死因子超家族成员15(TNFSF15)信号通路探讨益肾通络方抑制膜性肾病(MN)大鼠肾小球足细胞凋亡的分子机制.方法:80只SD大鼠采用预免疫和尾静脉注射阳离子化牛血清白蛋白(C-BSA)的方法建立MN大鼠模型,并使造模成功的MN大鼠随机分为模型组,益肾通络方高、中、低剂量组(26.44,13.22,6.61 g·kg-1)和贝那普利组(10mg·kg-1),每组各10只,取健康大鼠20只作为正常组,各组分别予对应药物灌胃,每日1次,连续干预4周.给药结束后,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测大鼠肾组织中miR-514a-5p及TNFSF15 mRNA表达水平;免疫组化(IHC)检测大鼠肾组织中足细胞标志蛋白足细胞裂孔膜蛋白(Nephrin),膜蛋白(Podocin),足萼蛋白(Podocalyxin),突触足蛋白(Synaptopodin),TNFSF15及足细胞凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax),Bcl-2关联死亡启动子重组蛋白(BAD),大分子B细胞淋巴瘤(Bcl-XL)的表达水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠肾组织中TNFSF 15,Bax,BAD,Bcl-2,Bcl-XL的表达水平;原位末端标记法(TUNNEL)检测大鼠肾组织细胞凋亡率.结果:与正常组比较,模型组大鼠肾组织中miR-514a-5p水平明显降低(P＜0.05),TNFSF15 mRNA水平明显升高(P＜0.05);足细胞标志蛋白Nephrin,Podocin,Podocalyxin,Synaptopodin表达明显降低(P＜0.05);TNFSF15,Bax,BAD蛋白表达水平明显升高(P＜0.05),Bcl-2,Bcl-XL蛋白表达水平明显降低(P＜0.05);凋亡细胞明显增多(P＜0.05).与模型组比较,益肾通络方各剂量组和贝那普利大鼠肾组织中miR-514a-5p水平明显升高(P＜0.05),TNFSF15 mRNA水平明显降低(P＜0.05);足细胞标志蛋白Nephrin,Podocin,Podocalyxin,Synaptopodin表达明显升高(P＜0.05);TNFSF15,Bax,BAD蛋白表达水平明显降低(P＜0.05),Bcl-2,Bcl-XL蛋白表达水平明显升高(P＜0.05);凋亡细胞明显减少(P＜0.05).结论:益肾通络方可能通过miR-514a-5p/TNFSF 15信号通路,减轻大鼠肾组织足细胞凋亡,缓解MN大鼠肾损伤.

关键词：膜性肾病、益肾通络方、足细胞、miR-514a-5p、TNFSF15

所属期刊栏目：28

分类号：R2-0;R22;R285.5;R289;R33

资助基金：河北省自然科学基金2019423037

在线出版日期：2022-01-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：121-130