槐耳清膏对人前列腺癌VCaP细胞增殖的作用

摘要：

目的:观察槐耳清膏对人前列腺癌VCaP细胞自噬的影响及对核纤层蛋白B1(Lamin B1)表达的调控作用,并探讨其在VCaP细胞增殖中发挥的作用.方法:采用细胞增殖与活性检测(CCK-8)法检测0,2,4,6,8,10g·L-1槐耳清膏在不同时间下对人前列腺癌VCaP细胞的增殖抑制作用.采用吖啶橙染色法分析槐耳清膏给药对VCaP细胞中自噬溶酶体形成的影响.借助蛋白免疫印迹法(Western blot)检测槐耳清膏给药后细胞中与自噬密切相关的蛋白微管相关蛋白Ⅰ轻链3(LC3),自噬相关蛋白3(Atg3),自噬相关蛋白5(Atg5),自噬相关蛋白7(Atg7)的表达.采用CCK-8法检测槐耳清膏与自噬抑制剂(Bafilomycin A1)联合给药及槐耳清膏单独给药对细胞增殖的作用.通过Western blot检测槐耳清膏对人前列腺癌VCaP细胞中Lamin B1表达的影响,并采用RNA干扰技术探究Lamin B1在槐耳抗人前列腺癌VCaP细胞增殖中的作用.结果:与空白组比较,槐耳清膏能抑制人前列腺癌VCaP细胞的增殖(P＜0.01),且呈时间与浓度依赖性.槐耳清膏给药后可促进VCaP细胞中自噬溶酶体的生成.与空白组比较,槐耳清膏能上调VCaP细胞中与自噬进程密切相关的蛋白LC3-II,Atg3,Atg5,Atg7表达水平(P＜0.05),槐耳清膏能够诱导VCaP细胞自噬的发生.进一步研究发现抑制自噬能够降低人前列腺癌VCaP细胞对槐耳清膏的敏感性(P＜0.05).与空白组比较,槐耳清膏给药能够抑制人前列腺癌VCaP细胞中Lamin B1蛋白表达(P＜0.01),下调LaminB1蛋白表达,在一定程度上也能够减弱VCaP细胞对槐耳清膏的敏感性(P＜0.01).结论:自噬活化和Lamin B1表达下调可能参与了槐耳清膏对人前列腺癌VCaP细胞的增殖抑制作用,能够为槐耳临床应用提供一定的理论基础.

关键词：槐耳清膏;人前列腺癌VCaP细胞;自噬;核纤层蛋白B1;细胞增殖

所属期刊栏目：28

分类号：R22;R242;R2-031;R285.5(中医基础理论)

资助基金：北京市科技新星计划项目;中华中医药学会青年人才托举工程项目

在线出版日期：2022-02-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：79-84