母婴分离/束缚应激模型小鼠海马小胶质细胞变化及温阳解郁方的调节作用

摘要：

目的:观察母婴分离/束缚应激诱发焦虑抑郁小鼠海马小胶质细胞激活和白细胞介素-1β(IL-1β),白细胞介素-6(IL-6),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达情况,探讨温阳解郁方抗焦虑抑郁的机制.方法:84只雄性C57BL仔鼠于出生后第0天(PD0)随机分为空白组、束缚应激组和造模组,造模组采取母婴分离结合束缚应激制备焦虑抑郁模型,将造模组按随机数字表法分为模型组、温阳组、解郁组、温阳解郁组和氟西汀组.在离乳第21天(PD21)至成年第90天(PD90),空白组、束缚应激组和模型组饲喂正常饲料,其余饲喂药混饲料(温阳组、解郁组、温阳解郁组和氟西汀组用药剂量分别为5.85,12.03,16.71 g·kg"及2.60 mg·kg-1).采用旷场实验,O迷宫和社会交互实验评估模型组小鼠焦虑抑郁状态;免疫组化法(IHC)观察海马小胶质细胞及离子钙接头蛋白-1(Iba-1)表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测IL-1β,IL-6,TNF-α,Iba-1,糖皮质激素受体(GR)mRNA表达水平.结果:与空白组比较,模型组小鼠5 min运动总路程和中央区活动时间显著减少(P＜0.01),开臂活动时间与活动总路程明显减少(P＜0.05,P＜0.01),训练探察时间和辨别探查时间显著增加(P＜0.01),Iba-1蛋白及mRNA表达,IL-1β,IL-6,TNF-α mRNA表达水平显著升高(P＜0.01),GR mRNA表达水平显著降低(P＜0.01),IHC结果显示小胶质细胞的过度激活.与模型组比较,温阳解郁方及氟西汀组小鼠5 min运动总路程和中央区活动时间显著上升(P＜0.01),开臂活动时间显著上升(P＜0.01),训练探察时间和辨别探查时间明显降低(P＜0.05,P＜0.01);Iba-1蛋白及mRNA表达,IL-1β,IL-6,TNF-α mRNA表达水平明显降低(P＜0.05,P＜0.01),GR mRNA表达水平显著上升(P＜0.01),IHC结果表明小胶质细胞的形态恢复;温阳组和解郁组小鼠开臂活动时间显著上升(P＜0.01),辨别探查时间明显降低(P＜0.05),Iba-1蛋白及mRNA表达,IL-6 mRNA表达水平明显降低(P＜0.05,P＜0.01);温阳组小鼠GR mRNA表达水平明显上升(P＜0.05),TNF-α mRNA表达水平明显降低(P＜0.05);解郁组小鼠5 min运动总路程显著上升(P＜0.01),训练探察时间明显降低(P＜0.05),IL-1β mRNA表达水平明显降低(P＜0.05),IHC结果表明两组小胶质细胞有所恢复.结论:温阳解郁方的综合疗效和药理作用优于温阳方和解郁方,其作用机制可能通过抑制母婴分离/束缚应激小鼠海马小胶质细胞的激活,降低IL-1β,IL-6,TNF-α等细胞因子的表达,增加海马GR表达,从而改善小鼠的焦虑抑郁样行为.

关键词：母婴分离;束缚应激;温阳解郁方;小胶质细胞;海马;二仙汤;逍遥散

所属期刊栏目：27

分类号：R2-0;R749.7+2;R33

资助基金：国家自然科学基金面上项目81573846

在线出版日期：2021-10-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：49-57