瘀血痹片对大鼠胶原诱导性关节炎的干预作用及抗炎机制

摘要：

目的:观察瘀血痹片对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠的干预作用并探索抗炎相关机制.方法:建立大鼠CIA模型,给药组和阳性药组分别灌胃给予低、中、高剂量瘀血痹片(0.1,0.2,0.4g·kg-1)和甲氨蝶呤(0.4 mg·kg-1),每3d检测发病率、机械痛敏阈值及冷刺激痛敏;给药30 d后取材,外周血检测血小板计数(PLT)及纤维蛋白原(FIB)含量;苏木素-伊红染色法分析CIA大鼠关节组织病理变化;免疫组化法(IHC)和蛋白免疫印迹法(Western blot)分别检测CIA大鼠关节组织中白细胞介素(IL)-1β,IL-8,核转录因子-κB(NF-κB)p65,磷酸化NF-κB p65(p-NF-κB p65),大鼠肉瘤(Ras)及Raf-1蛋白表达情况.此外,采用10μg·L-1的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导人类类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(RA-FLS),转移小室法检测RA-FLS迁移及侵袭能力.Western blot检测RA-FLS中Ras,Raf-1,p-NF-KBp65蛋白表达水平.结果:与正常组比较,CIA模型组发病率升高,机械痛阈值明显降低(P＜0.05,P＜0.01),冷刺激反应评分显著增高(P＜0.01),外周血中PLT和FIB含量,大鼠关节组织病理评分,RA-FLS迁移和侵袭细胞个数及炎性相关因子的表达水平均显著升高(P＜0.01);与模型组比较,瘀血痹片低、中、高剂量组均能降低CIA大鼠发病率,提高其机械痛阈值并降低冷刺激痛敏反应评分(P＜0.05,P＜0.01);降低CIA大鼠外周血中PLT和FIB含量(P＜0.05,P＜0.01),改善关节滑膜增生、骨及软骨破坏等病理变化(P＜0.05,P＜0.01),并抑制RA-FLS的迁移及侵袭.此外,瘀血痹片低、中、高剂量组均能不同程度地著抑制CIA大鼠关节组织中IL-1β,IL-8,Ras,Raf-1和p-NF-κB p65的含量,以及RA-FLS细胞中Ras,Raf-1及p-NF-κBp65等蛋白表达水平(P＜0.05,P＜0.01).结论:瘀血痹片具有降低大鼠CIA发病率、关节炎临床症状和改善关节组织病理变化、抑制滑膜生成等作用,并且这一作用可能与其对Ras/Raf-1/NF-KB信号通路的抑制有关.

关键词：类风湿关节炎(RA)、瘀血痹片、成纤维样滑膜细胞(FLS)、炎症因子、Ras/Raf-1/核转录因子-κB(NF-κB)

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分类号：R2-0;R22;R285.5;R289;R33

资助基金：重大新药创制"科技重大专项;中国中医科学院中药研究所技术研发项目;中国中医科学院中药研究所技术研发项目

在线出版日期：2021-06-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共11页

页码：52-62