扶正祛风方通过TGF-β1/Smad信号通路抑制膜性肾病大鼠足细胞转分化的机制

摘要：

目的:研究扶正祛风方对膜性肾病(MN)模型大鼠转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smad信号通路及足细胞上皮间充质转化(EMT)的影响,探讨其保护足细胞的分子机制.方法:大鼠随机分为正常组和造模组,造模组经阳离子化牛血清白蛋白(C-BSA)诱导构建MN模型后分为模型组、氯沙坦钾组(0.05 g·kg-1)及扶正祛风方高、中、低剂量(41,20.5,10.25 g·kg-1)组,给药4周.给药0,2,4周检测24 h尿蛋白(24 h-Upro)水平;给药4周后检测尿素氮(BUN)及血肌酐(SCr)水平,肾组织经苏木素-伊红(HE),马松(Masson),过碘酸-六胺银(PASM)染色后光镜观察病理改变,透射电镜观察肾小球基底膜(GBM),足突改变;免疫组化(IHC)观察足细胞EMT标志物结蛋白(Desmin)的分布及表达强度;蛋白免疫印迹法(Western blot)及实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)分别检测肾组织TGF-β1,Smad2/3,磷酸化Smad2/3 (p-Smad2/3),Smad7,Desmin mRNA及蛋白表达水平.结果:与正常组比较,模型组24 h-Upro,BUN,SCr水平显著升高(P＜0.01),免疫复合物沉积升高,GBM增厚和足突融合明显,Desmin mRNA及蛋白表达显著升高(P＜0.01),TGF-β1,Smad2,Smad3 mRNA及蛋白表达水平明显升高(P＜0.05),Smad3 mRNA及蛋白表达水平明显降低(P＜0.05,P＜0.01);与模型组比较,扶正祛风方各组及氯沙坦钾组24 h-Upro,BUN水平降低(P＜0.05),扶正祛风方中剂量组血SCr水平降低(P＜0.05),扶正祛风方各组及氯沙坦钾组肾小球上皮下免疫复合物沉积减少,GBM增厚和足突融合减轻,扶正祛风方高、中剂量组和氯沙坦钾组Desmin在基底膜的表达强度降低;扶正祛风方中剂量组肾组织TGF-β1和p-Smad2/Smad2 mRNA及蛋白表达降低,Smad7 mRNA及蛋白表达升高(P＜0.05),扶正祛风方高剂量组p-Smad3/Smad3 mRNA及蛋白表达降低(P＜0.05),扶正祛风方高、中剂量组及氯沙坦钾组肾组织Desmin mRNA及蛋白表达降低(P＜0.05).结论:扶正祛风方可能通过抑制TGF-β1/Smad信号通路激活介导的足细胞EMT实现MN足细胞保护的作用.

关键词：扶正祛风方、膜性肾病、大鼠、足细胞、上皮间充质转化(EMT)、转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smad信号通路

所属期刊栏目：27

分类号：R2-0;R22;R285.5;R289

资助基金：国家自然科学基金81904144

在线出版日期：2021-04-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：57-65