甘草查尔酮A通过调控MAPK信号通路抑制MH7A细胞增殖并诱导凋亡

摘要：

目的:探讨甘草查尔酮A(licochalconeA,LCA)对类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞(MH7A)增殖和凋亡以及相关炎性因子的影响,并揭示丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路与LCA调控MH7A细胞增殖和凋亡的关系.方法:培养MH7A细胞,将细胞分为空白组,LCA各浓度给药组(10,20,40 μmol· L-1);采用噻唑蓝(MTT)比色法和DAPI染色检测MH7A细胞增殖情况;PI染色和流式细胞仪检测MH7A细胞周期,Annexin V/PI染色后流式细胞仪检测MH7A细胞凋亡情况.实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测LCA对炎症因子白细胞介素-1β(IL-1β) mRNA的影响;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测LCA对MAPK信号通路关键蛋白的影响,同时应用细胞外信号调节激酶(ERK)特异性抑制剂PD98059处理,观察磷酸化(p)-ERK和IL-1β蛋白表达水平.结果:与空白组比较,LCA能剂量依赖性抑制MH7A细胞增殖,活细胞数量显著减少(P＜0.01),而进入细胞周期早期凋亡的细胞数量显著增多(P＜0.01).此外,与肿瘤坏死因子-α(TNF-α,10 μg·L-1)组比较,LCA能剂量依赖性逆转TNF-α导致的炎症因子IL-1β mRNA表达的升高(P＜0.01).与空白组比较,LCA能剂量依赖性的促进MAPK信号通路中关键蛋白ERK,氨基末端激酶(JNK)和p38的磷酸化表达(P＜0.01).与PD98059组比较,ERK的剂量依赖性磷酸化作用被抵消,同时LCA 10,20 μmol· L-1对IL-lβ的抑制作用消失.结论:LCA能抑制MH7A细胞增殖和诱导其凋亡,可能与其促进MAPK通路相关蛋白磷酸化的表达继而抑制炎症因子的表达有关.

关键词：甘草查尔酮A、类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞(MH7A)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路、细胞凋亡、白细胞介素(IL)-1β

所属期刊栏目：26

分类号：R2-0;R289;R285.5;R593.22

资助基金：国家自然科学基金;北京市自然科学基金面上项目;优秀青年科技人才创新类培养专项

在线出版日期：2020-12-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：68-74