厚朴酚衍生物CT2-3对结肠癌细胞的抑制作用及其机制

摘要：

目的:研究厚朴酚衍生物CT2-3对结肠癌细胞的抑制作用及其机制,为CT2-3在治疗结肠癌中的应用奠定基础.方法:体外培养SW480和LoVo细胞,不同浓度(10,20,40,80 μmol·L-1)CT2-3和厚朴酚分别干预24,48 h,采用细胞增殖-毒性检测(CCK-8)法检测CT2-3和厚朴酚对结肠癌细胞增殖的影响;采用平板克隆形成实验检测CT2-3对结肠癌细胞克隆形成能力的影响;进一步采用流式细胞术和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测CT2-3对结肠癌细胞凋亡和DNA损伤标志物磷酸化组蛋白H2AX(γH2AX)蛋白表达的影响;采用活性氧(ROS)试剂盒检测CT2-3对结肠癌细胞内ROS产生的影响;最后用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测CT2-3对结肠癌细胞内线粒体凋亡相关基因B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X基因(Bax)表达的影响.结果:给药24,48h,厚朴酚对两株结肠癌细胞SW480和LoVo的半数抑制浓度(IC50)均＞80 μmol·L-1,CT2-3对SW480细胞的IC50分别为(54.59±1.73)μm01·L-1和(29.82±1.13) μmol· L-1,对LoVo细胞的IC50分别为(66.68±2.11)μmol· L-1和(46.70±1.81)μmol·L-1;与空白组比较,CT2-3(20,40 μmol· L-1)组结肠癌细胞克隆形成能力显著下降(P＜0.01),且呈浓度依赖性.CT2-3组凋亡细胞显著增加(P＜0.01),γH2AX蛋白相对表达显著增加(P＜0.01);CT2-3组细胞内ROS水平显著增加(P＜0.01);CT2-3组细胞Bcl-2 mRNA相对表达显著下调(P＜0.01),Bax mRNA相对表达显著上调(P＜0.01).结论:CT2-3对结肠癌细胞具有显著抑制作用,其机制可能是通过激活Bcl-2/Bax信号通路使线粒体功能受损,促进ROS的产生,进一步诱导DNA损伤,从而导致结肠癌细胞凋亡.

关键词：厚朴酚、厚朴酚衍生物CT2-3、结肠癌、细胞凋亡、活性氧

所属期刊栏目：26

分类号：R22;R242;R2-031;R285.5(中医基础理论)

资助基金：应用基础研究项目;中国博士后科学基金

在线出版日期：2020-12-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：113-119