10.13422/j.cnki.syfjx.20202138
基于中效方程的黄芩苷与汉黄芩苷调控NF-κB信号通路的协同作用
目的:利用中效原理定量分析黄芩苷与汉黄芩苷合用的抗炎协同药效学机理.方法:通过脂多糖(LPS)100 μg·L-1刺激RAW264.7细胞构建体外炎症细胞模型;实验设置正常组,模型组,穿心莲内酯组(10 μmol·L-1),黄芩苷组(2.06,4.13,8.25,16.5,33,66,132 μmol·L-1),汉黄芩苷组(2.94,5.88,11.75,23.5,47,94,188 μmol·L-1)和黄芩苷-汉黄芩苷联合组[(2.06+2.94)(4.13+5.88)(8.25+ 11.75)(16.5+23.5)(33+47)(66+94)(132+ 188) μm01·L-1];采用酶联免疫吸附测定(ELISA)分别检测药物干预50 min和4h后细胞培养上清中的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)含量;采用硝酸盐还原酶(Griess)法检测药物干预24 h后细胞培养上清中一氧化氮(NO)的含量;蛋白免疫印迹法(Western blot)分别检测药物干预2,12h后细胞中磷酸化核转录因子-κB p65(p-NF-κB p65)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的活化水平;绘制作用率/非作用率(fa/fu)与剂量的关系表.结果:与正常组比较,模型组RAW264.7细胞中p-NF-κB p65蛋白和iNOS蛋白表达均明显增加(P＜0.05,P＜0.01),细胞因子TNF-α,IL-6和NO的表达均显著增加(P＜0.01);与模型组比较,各给药组高剂量可抑制p-NF-κB p65蛋白的表达(P＜0.05),汉黄芩苷组和联合组可浓度依赖性下调iNOS蛋白的表达(P＜0.01),黄芩苷组无明显差异.各给药组高剂量均可显著抑制NO的生成(P＜0.05),对IL-6生成无明显抑制作用.汉黄芩苷组和联合组可显著抑制TNF-α的生成(P＜0.05),黄芩苷组无明显差异;在实验剂量下,fa/fu与剂量关系表显示,联合组p-NF-κB p65活化和IL-6生成的fa/fu小于黄芩苷组和汉黄芩苷组,联合组iNOS,TNF-α和NO生成的fa/fu在高剂量时大于黄芩苷组和汉黄芩苷组.结论:黄芩苷和汉黄芩苷对NF-κB通路中不同靶标作用强度差异较大,汉黄芩苷是二者合用的主体药效物质,二者合用对不同靶点表现为不同程度的协同或拮抗作用.
黄芩苷、汉黄芩苷、炎症、联合用药、协同增效、核转录因子-κB
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R2-0;R289;R285.5
国家自然科学基金81773974
2020-11-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共8页
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