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10.13422/j.cnki.syfjx.20202038

当归补血汤对内皮祖细胞氧化应激损伤的保护作用

引用
目的:研究当归补血汤(DBT)对过氧化氢(H2O2)诱导的小鼠骨髓来源内皮祖细胞(EPCs)氧化应激损伤的保护作用.方法:采用密度梯度离心法获取小鼠骨髓来源的单核细胞,通过特定培养基培养并鉴定获得EPCs,实验分为空白组,模型组,DBT组(100,200,400 mg·L-1).采用噻唑蓝(MTT)比色法测定EPCs细胞存活率,构建H2O2诱导的细胞损伤模型;通过MTT,迁移小室(transwell),Matrigel基质胶,超氧化物荧光阴离子探针(DHE),分别检测EPCs增殖、迁移与体外血管形成能力,以及活性氧(ROS)水平,蛋白免疫印迹法(Westem blot)检测细胞自噬相关蛋白泛素结合蛋白SQSTM1(p62),微管相关蛋白1轻链3Ⅱ型蛋白(LC3-Ⅱ)的蛋白表达.结果:与空白组比较,模型组EPCs细胞增殖能力、迁移能力、成管腔数及小管分支长度均显著降低(P<0.01),胞内ROS水平显著升高(P<0.01),自噬标志性蛋白p62显著升高(P<0.01),LC3-Ⅱ蛋白表达降低(P<0.01);与模型组比较,DBT组能呈浓度依赖性地升高EPCs增殖能力与迁移能力(P<0.01),增加细胞成管腔数和小管分支长度(P<0.01),降低胞内ROS水平(P<0.01);此外,DBT呈浓度依赖性上调了LC3-Ⅱ蛋白的表达(P<0.01),降低p62蛋白的表达(P<0.01).结论:当归补血汤能提高氧化应激状态下的EPCs自噬水平,促进损伤的EPCs迁移、增殖能力与血管形成能力,保护氧化应激条件下内皮祖细胞的生物学功能.

当归补血汤、内皮祖细胞、氧化应激、生物学功能、自噬

26

R2-0;R289;R54;R743

国家自然科学基金;广州市科技计划

2020-11-02(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

共7页

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1005-9903

11-3495/R

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2020,26(20)

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