基于PI3K/Akt/mTOR信号通路探讨炙甘草汤抗大鼠MIRI致室速和室颤的作用机制

摘要：

目的:通过磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路,探讨炙甘草汤干预心肌缺血再灌注损伤(MIRI)致心律失常(室速和室颤)的作用及其机制.方法:将72只SD大鼠随机分为假手术组,模型组,炙甘草汤低、中、高剂量组(11.43,22.86,45.72 g·kg-1),稳心颗粒组(2.43 g·kg-1),连续给药干预10d.末次给药2h,采用结扎冠状动脉左前降支法制备大鼠MIRI模型,记录心电图的变化.造模成功后采集血液及心脏组织,检测血清中肌酸肌酶(CK),乳酸脱氢酶(LDH)及丙氨酸氨基转移酶(AST)的含量;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测心肌肌钙蛋白(CtnI)的含量;免疫组化法检测心肌PI3K,Akt,mTOR的表达;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测心肌自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC-3),自噬标志物Beclin1和PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白表达及磷酸化p-PI3K,p-Akt,p-mTOR的水平.结果:模型组大鼠100％发生室速,91.67％发生室颤;与假手术组比较,模型组大鼠血清CK,LDH,AST以及CtnI的含量显著升高(P＜0.01),心肌组织中PI3K,Akt,mTOR表达显著升高(P＜0.01),LC3-Ⅱ/LC3-I与Beclin1的相对表达量显著升高(P＜0.01),p-PI3K/PI3K,p-Akt/Akt,p-mTOR/mTOR显著降低(P＜0.01);与模型组比较,炙甘草汤高剂量组室速、室颤发生率显著降低(P＜0.01),较其他给药组持续时间短(P＜0.01);炙甘草汤高剂量组CK,LDH,AST水平及CtnI含量显著降低(P＜0.01);炙甘草汤给药组的PI3K,Akt,mTOR的表达随剂量的增加而显著降低(P＜0.01);LC-3,Beclin1的表达随炙甘草汤各剂量组的增加有不同程度地下降(P＜0.01),而PI3K/Akt/mTOR相关蛋白表达比值明显升高(P＜0.05,P＜0.01).结论:炙甘草汤预处理能使异常升高的心肌酶CK,LDH,AST,CtnI降低,抑制细胞的过度自噬,上调PI3K,Akt和mTOR的表达,说明炙甘草汤抗MIRI致心律失常的作用可能与PI3K/Akt/mTOR信号通路有关.

关键词：炙甘草汤、心肌缺血再灌注损伤、心律失常、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路

所属期刊栏目：26

分类号：R2-0;R289;R541.7

资助基金：内蒙古自然科学基金项目2017MS0801

在线出版日期：2020-08-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1-8