基于RhoA/ROCK通路探讨淫羊藿苷对肾病综合征大鼠的保护机制

摘要：

目的:研究淫羊藿苷对肾病综合征(NS)大鼠肾素同源蛋白A(RhoA)/Rho相关激酶(ROCK)通路的影响和保护机制.方法:实验对象为54只清洁级雄性SD大鼠,随机均分为正常组,模型组,RhoA抑制剂组(Rhosin,40 mg·kg-1·d-1)和淫羊藿苷低、中、高剂量组(30,60,120 mg·kg-1·d-1).模型组大鼠尾静脉注射6.5 mg·kg-1盐酸阿霉素给,诱导大鼠NS发生.造模后腹膜给药,正常组和模型组给予生理盐水2.5 mL·d-1,抑制剂组和各剂量组分别给对应剂量的Rhosin和淫羊藿苷进行干预.试剂盒检测各组大鼠尿总蛋白(Alb),尿肌酐(Cre)水平,计算尿总蛋白/肌酐值(A/C);透射电镜(TEM)鉴定肾脏超微病理;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测RhoA,ROCK1,ROCK2 mRNA水平和蛋白表达.结果:TEM结果显示,正常组基底膜完整,足突规整;模型组基底膜损坏严重,足突出现消失、融合严重;淫羊藿苷低剂量组基底膜损伤减轻,足突的数量和密度改善、融合明显;淫羊藿苷中剂量组和抑制剂组,基底膜增厚情况减轻,足突轻度融合;淫羊藿苷高剂量组基底膜结构较完整,足细胞较长、排列较紧密.与正常组比较,模型组大鼠24 h尿蛋白量、尿液中Cre,A/C,肾组织RhoA,ROCK1,ROCK2mRNA和蛋白水平明显升高(P＜0.05).与模型组比较,抑制剂组和淫羊藿苷低、中、高剂量组24h尿蛋白量,A/C和肾组织中RhoA,ROCK1,ROCK2mRNA和蛋白水平,抑制剂组和淫羊藿苷高剂量组尿液中Cre明显降低(P＜0.05).与抑制剂组比较,淫羊藿苷高剂量组24h尿蛋白量、尿液中Cre和肾组织RhoA蛋白水平明显降低(P＜0.05);淫羊藿苷低剂量组24h尿蛋白量、尿液中Cre,A/C和肾组织RhoA,ROCK1,ROCK2 mRNA和蛋白水平,淫羊藿苷中剂量组肾组织RhoA,ROCK1,ROCK2 mRNA水平明显升高(P＜0.05).与淫羊藿苷低剂量组比较,淫羊藿苷中、高剂量组尿液中Alb,A/C和肾组织RhoA,ROCK1,ROCK2 mRNA和蛋白水平,淫羊藿苷高剂量组尿液中Cre明显降低(P＜0.05).与淫羊藿苷中剂量组比较,淫羊藿苷高剂量组24h尿蛋白量、尿液中Cre和肾组织RhoA,ROCK1 mRNA和蛋白水平,肾组织ROCK2 mRNA明显降低(P＜0.05).结论:在NS大鼠治疗过程中,淫羊藿苷可能通过影响RhoA/ROCK通路,实现肾小球内皮和足细胞保护作用.

关键词：淫羊藿苷、肾病综合征、大鼠、肾素同源蛋白A(RhoA)、Rho相关激酶1(ROCK1)、ROCK2

所属期刊栏目：26

分类号：R2-0;R22;R285.5

资助基金：国家自然科学基金;甘肃省自然科学基金

在线出版日期：2020-06-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：78-84