10.13422/j.cnki.syfjx.20200123
益气健脾化瘀方协同5-FU对胃癌的抑制作用及机制
目的:观察益气健脾化瘀方协同5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)对615小鼠胃癌生长的抑制作用,并通过肿瘤微环境中的肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophages,TAMs)极化方向,探讨其可能的作用机制.方法:40只615小鼠随机分为正常组,益气健脾化瘀方(25 g·kg-1)组,5-FU(25 mg· kg-)组,联合(益气健脾化瘀方25 9·kg-1+ 5-FU 25 mg· kg-1)组,每组10只.腋下接种MFC胃癌细胞建立小鼠胃癌移植瘤模型.苏木素-伊红(hematoxylin-eosin staining,HE)染色法观察各组小鼠肿瘤病理的改变;流式细胞仪测定肿瘤组织中M1,M2型TAMs含量;免疫组化观察腋下移植瘤中CD206的表达;实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测瘤组织中TAMs相关基因白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β),白细胞介素-12(interleukin-12,IL-12),肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α),精氨酸酶1(arginase-1,Arg1),几丁质酶3蛋白3(chitinase 3-like 3,Ym1)的mRNA表达水平.Real-time PCR,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测瘤组织中上皮间质转化(epithelial mesenchymal transformation,EMT)相关上皮性钙黏附蛋白(E-cadherin),神经性钙黏附蛋白(N-cadherin),锌指转录因子Slug,Snail,波形蛋白(Vimentin) mRNA及蛋白的表达.结果:各组小鼠胃癌细胞排列呈巢状及片状,细胞间质见促纤维结缔组织反应及少量炎症细胞浸润.各药物组可见明显肿瘤凝固性坏死,残留肿瘤细胞量正常组＞益气健脾化瘀方组＞5-FU组＞联合组.免疫组化表明,各给药组均能减少瘤体CD206的表达,以联合组最明显.流式细胞仪检测证实,与正常组比较,各给药组均能减少M2型TAMs的含量(P ＜0.05,P＜0.01),联合组减少M2型TAMs的含量最明显;益气健脾化瘀方组、联合组均能增加M1型TAMs的含量(P＜0.05,P＜0.01),以益气健脾化瘀方组最为明显.与正常组比较,益气健脾化瘀方组、联合组均能下调Arg1,Ym1 mRNA,上调IL-1β,TNF-α,IL-12 mRNA表达(P＜0.05).与5-FU组比较,联合组能明显升高IL-1β,IL-12,TNF-α mRNA,下调Arg1,Ym1 mRNA表达(P＜0.05).与正常组比较,益气健脾化瘀方组能上调E-cadherin mRNA及蛋白表达(P＜0.05),下调N-cadherin,Vimentin mRNA表达(P＜0.05);联合组能上调E-cadherin,下调N-cadherin,Slug,Snail,Vimentin mRNA表达(P＜0.05),上调E-cadherin,下调N-cadherin,Slug蛋白表达(P＜0.01).与5-FU组比较,联合组能上调肿瘤组织中E-cadherin,下调N-cadherin,Slug,Vimentin mRNA及蛋白表达(P＜0.05).结论:益气健脾化瘀方对胃癌生长有一定的抑制作用,与5-FU联用有较好的协同抑制胃癌生长、改善胃癌上皮间质转化,机制可能与促进胃癌中TAMs从M2表型向M1表型转化有关.
益气健脾化瘀方、5-氟尿嘧啶、胃癌、肿瘤相关巨噬细胞、上皮间质转化
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R22;R242;R2-031;R285.5(中医基础理论)
国家自然科学基金;国家自然科学基金;江苏省中医药局项目;江苏省中医药局项目
2020-04-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共8页
65-72
