断藤益母汤对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞MEKK2及CIA小鼠关节炎的影响

摘要：

目的:为了研究断藤益母汤(DTYMD)在类风湿关节炎中对丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)上游激酶的调控作用,阐明DTYMD抗炎的分子机制.方法:培养成纤维样滑膜细胞,将细胞分为空白组,模型组,DTYMD高、中、低质量浓度组(1 000,800,600 mg·L-1),甲氨蝶呤(MTX)组(20 μmol· L-1)组,采用蛋白免疫印迹法(Western blot),实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)对丝分裂原活化蛋白激酶激酶激酶2(MEKK2)的蛋白和mRNA表达进行分析.将42只雄性DBA/1J小鼠随机分为6组,每组7只,分别为正常组,模型组,MTX组(2 mg· kg-1),DTYMD低、中、高剂量组(6.25,12.5,25 mg· kg-1).除正常组外,其他5组均采用二次免疫法构建胶原诱导型关节炎(CIA)模型.给药结束后,取小鼠后肢踝关节行苏木素-伊红(HE)染色并进行关节病理评分.结果:与模型组比较,DTYMD以浓度依赖方式抑制成纤维样滑膜细胞活性(P＜0.01);与空白组比较,模型组细胞增殖率升高(P＜0.01).与模型组比较,DTYMD高、中质量浓度组降低MEKK2蛋白及mRNA的表达(P＜0.05,P＜0.01).与模型组比较,DTYMD不同剂量组均降低细胞基质金属蛋白酶-1(MMP-1),肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-6(IL-6)的表达(P＜0.01);与空白组比较,模型组MMP-1,IL-6,TNF-α表达明显上升(P ＜0.05,P＜0.01).在动物实验中,与模型组比较,DTYMD高、中剂量组可以降低CIA小鼠关节肿胀度(P ＜0.05,P＜0.01);与正常组比较,模型组小鼠二次免疫后关节明显肿胀(P＜0.05).在CIA小鼠踝关节HE染色中,与空白组比较,模型组小鼠病理学评分升高(P＜0.01);与模型组比较,DTYMD高、中剂量小鼠关节病理评分明显下降(P ＜0.05,P＜0.01).结论:DTYMD可能通过下调MEKK2对细胞因子IL-6,TNF-α,MMP-1负性调控,从而缓解类风湿关节炎的炎症反应.

关键词：断藤益母汤、类风湿关节炎、丝分裂原活化蛋白激酶激酶激酶2、炎症因子、胶原诱导关节炎小鼠模型

所属期刊栏目：26

分类号：R2-0;R22;R285.5;R289

资助基金：国家自然科学基金;国家自然科学基金;广东省自然科学基金;广东省自然科学基金;中央高校基本科研业务费专项

在线出版日期：2020-04-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共11页

页码：31-41