基于Wnt/β-catenin信号通路探讨大补元煎促进APP/PS1双转基因阿尔茨海默病小鼠海马神经发生的作用机制

摘要：

目的:通过研究大补元煎对淀粉样前体蛋白/早老素1(APP/PS1)小鼠海马Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路的作用,探讨大补元煎促进神经发生的可能机制.方法:5月龄APP/PS1小鼠30只和野生鼠10只,分为正常组、模型组、奈哌齐组(6.5×10-4g·kg-1·d-1)和大补元煎组(13.2 g·kg-1·d-1),灌胃30 d,正常组和模型组给予等体积生理盐水.应用水迷宫评价小鼠学习记忆力;应用苏木素-伊红(HE)染色观察小鼠海马神经元病理形态变化;应用免疫组化(IHC)检测5-溴脱氧尿苷(Brdu),肾上腺皮质激素(Dcx)和神经元核抗原(NeuN)的阳性细胞数;应用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测小鼠海马中β-catenin,糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)mRNA和蛋白表达水平.结果:与正常组比较,模型组小鼠平台潜伏期和游泳总路程显著升高(P＜0.01),而穿越平台次数和目标象限时间显著降低(P＜0.01);与模型组比较,多奈哌齐组和大补元煎组小鼠平台潜伏期和游泳总路程降低(P ＜0.05,P＜0.01),而穿越平台次数和目标象限时间升高(P＜0.05).与正常组比较,模型组小鼠海马齿状回(DG)区神经元层次和数量减少,可见明显坏死的神经元;与模型组比较,多奈哌齐组和大补元煎组小鼠海马DG区神经元层次和数量增多,坏死神经元数量减少.与正常组比较,模型组小鼠海马DG区Brdu,Dcx和NeuN标记的阳性细胞数明显降低(P＜0.01);与模型组比较,多奈哌齐组和大补元煎组小鼠海马DG区Brdu,Dcx和NeuN标记的阳性细胞数增加(P ＜0.05,P＜0.01).与正常组比较,模型组小鼠海马中β-cateninmRNA和蛋白表达水平显著下降(P＜0.01),而GSK-3β的基因和蛋白表达水平显著升高(P＜0.01);与模型组比较,多奈哌齐组和大补元煎组小鼠海马β-catenin mRNA和蛋白表达水平升高(P ＜0.05,P＜0.01),而GSK-3β mRNA和蛋白表达水平下降(P＜0.05,P＜0.01).结论:大补元煎通过调节Wnt/β-catenin信号通路促进APP/PS1双转基因小鼠海马神经发生.

关键词：大补元煎、阿尔茨海默病、神经发生、Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路、机制

所属期刊栏目：26

分类号：R2-0;R22;R285.5;R289

资助基金：国家自然科学基金81573865

在线出版日期：2020-04-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：8-14