氧化苦参碱抑制胰岛素诱导人结肠癌HT-29细胞的增殖及迁移作用

摘要：

目的:利用胰岛素培养人结肠癌细胞HT-29,体外模拟糖尿病患者体循环中高胰岛素环境,研究氧化苦参碱(OMT)对胰岛素诱导的人结肠癌HT-29细胞增殖和迁移的影响.方法:采用噻唑蓝(MTT)比色法和平板克隆实验检测OMT(2,4,8 mmol·L-1)对胰岛素诱导HT-29的增殖作用,倒置显微镜观察该模型下细胞形态的变化;通过划痕修复实验评价OMT对胰岛素诱导的HT-29迁移能力,流式细胞术Annexin V/碘化丙啶(PI)双染实验检测该模型中HT-29细胞周期与凋亡的变化;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞周期相关蛋白的表达以及细胞迁移相关蛋白的表达.结果:MTT比色法、平板克隆及划痕修复实验均显示,与空白组比较,胰岛素能促进人结肠癌HT-29细胞的增殖和迁移(P＜0.05);选择2,4,8 mmol·L-1 OMT处理细胞24 h,与胰岛素组比较,OMT 4,8 mmol· L-1明显抑制其增殖作用(P＜0.05),可诱导HT-29细胞发生G0/G1期阻滞(P＜0.05),8 mmol·L-1 OMT下调细胞周期蛋白D1(CyclinD1)和周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)表达(P＜0.05),上调周期负调节蛋白p27水平(P＜0.05);此外,划痕修复实验结果显示,与胰岛素组比较,OMT各浓度组均能抑制胰岛素诱导的细胞迁移作用(P＜0.05),其机制可能与增加黏附蛋白(E-cadherin)(P＜0.05)和降低波形蛋白(Vimentin)(P＜0.05)相关.结论:OMT能抑制胰岛素诱导的人结肠癌HT-29细胞增殖及迁移作用,其作用机制可能与调控细胞周期及迁移相关蛋白有关.

关键词：HT-29细胞、氧化苦参碱、胰岛素、细胞增殖、细胞迁移

所属期刊栏目：25

分类号：R22;R242;R2-031;R285.5(中医基础理论)

资助基金：贵州省教育厅青年科技人才成长项目;贵州省科技厅项目;贵州省科技厅社会发展科技攻关计划;贵州省科技厅社会发展科技攻关计划;黔科合人才团队项目;贵州省高层次创新型人才培养项目;国家国际科技合作专项基金;遵义医学院基础药理省部共建教育部重点实验开放课题项目;基础研究项目

在线出版日期：2019-12-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：36-42