瓜蒌皮提取物基于PI3K/Akt/NO信号通路保护缺氧/复氧损伤心肌细胞的机制

摘要：

目的:研究磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/一氧化氮(PI3K/Akt/NO)信号通路在瓜蒌皮提取物保护心肌细胞缺氧/复氧损伤中的作用.方法:以2.5 mmol·L-1 Na2S2O4诱导心肌细胞建立缺氧/复氧损伤模型,实验分为正常组、模型组、瓜蒌皮提取物组及抑制剂组.采用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活力;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测心肌细胞中一氧化氮(NO)的释放量及内皮型一氧化氮合酶(eNOS),诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的活性水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测细胞中Akt,eNOS,iNOS mRNA表达水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)测定Akt,磷酸化Akt (p-Akt),eNOS,iNOS蛋白表达水平.结果:与正常组比较,模型组心肌细胞活力明显下降(P＜0.01),心肌细胞NO释放量减少(P＜0.01),心肌细胞中p-Akt,Akt及eNOS mRNA和蛋白表达显著降低(P＜0.01),而iNOS mRNA和蛋白表达显著升高(P＜0.叭);与模型组比较,瓜蒌皮提取物预处理24 h后能改善心肌细胞形态,明显提高心肌细胞活力(P＜0.01).瓜蒌皮提取物能促进p-Akt,Akt及eNOS mRNA和蛋白表达(P＜0.01),抑制iNOS mRNA和蛋白的表达(P＜0.01),增加心肌细胞NO的释放量(P＜0.01).PI3K抑制剂LY294002与瓜蒌皮提取物联合处理后,逆转了瓜蒌皮提取物对心肌细胞的上述作用,导致细胞存活率下降.结论:瓜蒌皮提取物可能通过激活PI3 K/Akt信号通路上调eNOS,下调iNOS的表达,增加内源性NO的基础含量水平,发挥抗凋亡作用,从而改善缺氧/复氧损伤诱导的心肌细胞损伤.

关键词：瓜蒌皮提取物、缺氧/复氧损伤、心肌细胞、磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/一氧化氮(PI3K/Akt/NO)

所属期刊栏目：25

分类号：R2-0;R22;R285.5

资助基金：辽宁省自然科学基金;辽宁省教育厅科学研究项目;辽宁省大学生创新训练项目

在线出版日期：2019-11-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：42-48