加味柴胡疏肝汤调控miRNA-204对癫痫小鼠海马自噬的影响

摘要：

目的:观察加味柴胡疏肝汤对癫痫小鼠海马微小非编码RNA 204(miRNA-204)的表达影响,探讨其发挥神经保护作用的机制.方法:将60只小鼠随机分为6组:正常组,模型组(盐酸匹罗卡品180 mg· kg-1),加味柴胡疏肝汤组(7 g·kg-1·d-1),加味柴胡疏肝汤+miRNA-204模拟物组(7 g·kg-1 ·d-1 +2 μL),加味柴胡疏肝汤+miRNA-204抑制物组(7 g·kg-1·d-1 +2 μL),卡马西平组(30 mg·kg-1·d-1),各灌胃2周;采用匹罗卡品使小鼠致痫,6组分别灌胃给药、抑制及过表达miRNA-204后,处死小鼠,取其海马组织,观察每组的指标情况,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测小鼠海马miRNA-204的表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测自噬相关蛋白微管相关蛋白轻链3(LC3),自噬相关标志性蛋白7(ATG7)的表达情况,苏木素-伊红(HE)染色观察每组小鼠海马病理学变化;透射电镜观察各组小鼠海马组织自噬情况.结果:与正常组比较,模型组小鼠miRNA-204表达显著降低(P＜0.01),海马C1区病理改变最明显,ATG7,LC3Ⅱ/LC3 Ⅰ表达显著升高(P＜0.01),自噬小体数量最多;与模型组比较,加味柴胡疏肝组小鼠海马组织miRNA-204表达明显升高(P＜0.05),海马C1区病理改变减轻,ATG7,LC3Ⅱ/LC3 Ⅰ表达明显降低(P＜0.05),自噬小体数量减少;加味柴胡疏肝汤+miRNA-204模拟物组小鼠海马组织miRNA-204表达显著升高(P＜0.01),海马C1区病理改变最轻,ATG7,LC3Ⅱ/LC3 Ⅰ表达显著降低(P＜0.01),自噬小体数量最少;与加味柴胡疏肝汤比较,加味柴胡疏肝汤+miRNA-204抑制物组上述指标变化趋势相同,变化幅度明显减少(P＜0.05).结论:加味柴胡疏肝汤可以改善癫痫小鼠海马组织病理改变,其作用机制可能是通过升高癫痫小鼠海马miRNA-204的表达,抑制神经元过度自噬,减少细胞凋亡.

关键词：柴胡疏肝汤、癫痫、miRNA-204、自噬

所属期刊栏目：25

分类号：R2-0;R285;R289;R742.1

资助基金：国家自然科学基金;广西自然科学基金;广西卫生适宜技术研究与开发项目

在线出版日期：2019-11-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1-7