加减薯蓣丸通过Akt/GSK3β/Nrf2通路改善APP/PS1小鼠神经元凋亡

摘要：

目的:探讨加减薯蓣丸对APP/PS1模型小鼠神经保护的效应和作用机制.方法:5月龄雄性APP/PS1小鼠20只和野生型小鼠10只,分为空白组、模型组、加减薯蓣丸组(14 g·kg-1·d-1),灌胃28 d,空白组、模型组给予等体积生理盐水;APP/PS1背景和野生型背景原代神经元,分为空白组、模型组、加减薯蓣丸组、衣霉素组和磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)抑制剂组,空白组、模型组给予10％空白血清,加减薯蓣丸组给予5％加减薯蓣丸含药血清干预,衣霉素组和PI3K/Akt抑制剂组分别在加减薯蓣丸基础上加用2mg· L-1的衣霉素和10 μmol· L-1的LY294002.采用Morris水迷宫检测小鼠学习记忆能力;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测海马核因子E2相关因子2(Nrf2)蛋白表达;Western blot检测内质网应激相关蛋白糖调节蛋白78(GRP78),蛋白激酶样内质网激酶(PERK),磷酸化(p-)PERK,凋亡通路蛋白真核生物的翻译起始因子2的α亚基(eIF2α),p-eIF2α,增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP),半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)和p-Akt,Akt,糖原激酶3β(GSK3β),Nrf2蛋白表达.结果:体内实验中,与空白组比较,模型组APP/PS1小鼠学习记忆能力显著下降(P＜0.01),海马Nrf2表达显著下调(P＜0.01);与模型组比较,加减薯蓣丸干预4周后,加减薯蓣丸组APP/PS1小鼠学习记忆能力明显提升,海马Nrf2表达水平显著增加(P＜0.01).体外实验中,与空白组比较,模型组GRP78,p-PERK/PERK,p-eIF2α/eIF2α,CHOP,cleaved Caspase-3蛋白表达显著增加(P＜0.01);与模型组比较,加减薯蓣丸含药血清明显降低GRP78,p-PERK/PERK,p-eIF2α/eIF2α,CHOP,cleaved Caspase-3蛋白表达(P ＜0.05,P＜0.01);而衣霉素抑制加减薯蓣丸对内质网应激诱导凋亡的保护效应(P＜0.05);与空白组比较,模型组p-Akt/Akt,Nrf2蛋白表达显著下降,GSK-3β表达显著增加(P＜0.01);与模型组比较,加减薯蓣丸含药血清干预后p-Akt/Akt,Nrf2蛋白表达显著增加,GSK-3β表达明显降低(P ＜0.05,P＜0.01);LY294002抑制加减薯蓣丸对p-Akt/Akt,Nrf2和GSK3β蛋白表达的影响(P ＜0.05,P＜0.01).结论:加减薯蓣丸通过PI3 K/Akt/GSK3β信号通路上调Nrf2蛋白表达,减轻内质网应激诱导的神经元凋亡,改善APP/PS1模型小鼠学习记忆能力.

关键词：阿尔茨海默病、加减薯蓣丸、核因子E2相关因子2、内质网应激、凋亡

所属期刊栏目：25

分类号：R2-0;R285;R289;R338

资助基金：湖北省自然科学基金;中国中医科学院中医基础理论研究所自主选题院所协同创新科研专项基金项目;湖北中医药大学研究生创新能力提升项目

在线出版日期：2019-11-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：38-44