猪胆粉及其中成药的特异性PCR鉴别方法

摘要：

目的:建立一种适用于猪胆粉及其中成药的特异性聚合酶链式反应(PCR)鉴别方法,为复杂组分中动物源性成分的鉴定提供示范.方法:根据猪源性鉴别引物,建立PCR鉴别方法,优化反应体系,并对此方法进行考察和验证.利用建立的PCR鉴别方法,对20批自制猪胆粉药材,19批市售猪胆粉药材和22批含猪胆粉中成药的猪源性成分进行鉴别,将市售的猪胆粉药材和含猪胆粉中成药PCR扩增的阳性产物进行酶切验证和序列测定验证.结果:20批自制猪胆粉药材、猪胆粉对照药材均能扩出约212 bp的特异性鉴别条带,牛和羊参考品均无条带;19批市售猪胆粉药材中仅5批扩出特异性鉴别条带;22批含猪胆粉中成药中有10批检出猪源性成分;猪胆粉对照药材及市售猪胆粉药材PCR扩增的阳性产物经Mnl酶切后均能产生约200 bp的条带;猪胆粉及其中成药中扩增产物序列与GenBank数据库中相似性最高的物种为Sus scrofa,一致性为99％,与猪的序列高度一致.结论:该文建立的特异性PCR鉴别方法可准确鉴别猪胆粉及其中成药中的猪源性成分.

关键词：猪胆粉、中成药、特异性聚合酶链式反应、分子鉴别

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分类号：R284.2;R285;R22;R2-031(中药学)

资助基金：国家药典委员会《中国药典》药品标准提高项目;中央级公益性科研院所基本科研业务费专项;中央本级重大增减支项目

在线出版日期：2019-08-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：136-141